Caracterización de la actividad alergénica y enzimática de extractos somáticos producidos a partir de cultivos in vitro del ácaro Dermatophagoide farinae

Abstract

Introduccion: El Dermatophagoides fainae (DF) es un acaro cosmopolita presente en el polvo intradomiciliario. Este acaro es fuente importante de aereo-alergenos desencadenantes de asma y rinitis alergica. Objetivo: El proposito de este trabajo fue la produccion y caracterizacion de extractos alergenicos para uso en diagnostico alergologico y terapia. Metodos: Los extractos se prepararon a partir de cultivos puros in vitro de acaros. Las proteinas del acaro fueron extraidas mediante lisis osmotica. La concentracion de proteinas se determino por microensayo de Bradford y el perfil electroforetico fue identificado por SDS-PAGE. La actividad enzimatica fue evaluada con el estuche comercial Api Zym (Biomeriux R) y la actividad alergenica por inmunoensayo de Dot Blot. Resultados: Se prepararon cinco lotes de extractos. La media del peso seco de material extraido fue 37,04 mg/gramo de acaros ( DE= 11,3) y la media de la cantidad de proteina fue 212,4 ¿Êg/mg de peso seco (DE= 33,3). El perfil SDS-PAGE mostro la presencia de 8 bandas comunes (21-109 kDa). Todos los extractos presentaron actividad enzimatica hidrolasa. Tambien se demostro actividad tripsina, alfa-amilasa y alfa-quimiotripsina, correspondientes a los alergenos de los acaros del grupo 3, 4 y 6 respectivamente. Todos los extractos tuvieron proteinas con capacidad de union a los anticuerpos IgE. Conclusion: Aqui presentamos la produccion de extractos del acaro DF, con actividad alergenica. Estos resultados fundamentaran la produccion a escala de extractos alergenicos de acaros desencadenantes de enfermedades alergicas en el humano, con fines diagnosticos y de aplicacion terapeutica.

Keywords

• ácaros
• extractos
• alérgenos
• actividad enzimática