IMPORTÂNCIA DO CONSERVANTE TRANSFIXNA AVALIAÇÃO DE AMOSTRAS DE LÍQUIDO CEFALORRAQUIDIANO: EXPERIÊNCIA DE UM SERVIÇO DE CITOMETRIA DE FLUXO DE UM HOSPITAL UNIVERSITÁRIO

Abstract

Objetivos: O envolvimento do sistema nervoso central (SNC) por neoplasias hematológicas é considerado uma complicação grave em pacientes com leucemias e linfomas. A análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) por citometria de fluxo (CF) é bastante estabelecida e possui papel importante na definição prognóstica e avaliação de resposta ao tratamento dessas doenças. Porém, a degeneração celular rápida que ocorre neste material leva à necessidade de processamento imediato da amostra. Nesse sentido, o conservante celular Transfix®(Cytomark) tem sido amplamente utilizado, pois as amostras de LCR podem ser processadas em até 18-72h, sem perda celular. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar as amostras de LCR antes e depois do estabelecimento do protocolo de coleta com Transfix®, em um Hospital Universitário. Material e métodos: Foram incluídas no estudo 142 amostras de LCR sem Transfix® e 142 com Transfix®. As amostras sem Transfix® colhidas entre 11/2017 e 09/2019 foram encaminhadas ao setor de CF em seringas contendo 1-10mL de LCR. A partir de 10/2019, tubos de EDTA 4mL contendo 100uL de Transfix® foram encaminhados às unidades do Hospital. As amostras com Transfix® obtidas entre 11/2019 e 04/2021 foram colhidas diretamente no tubo de EDTA/Transfix®contendo 1-4mL de LCR. Os LCR sem Transfix® foram processados imediatamente, enquanto aqueles colhidos com Transfix® foram acondicionados a 2 a 8°C até o momento do processamento (máximo 72h). Para a análise estatística, foram incluídos apenas os LCR com mais de 10 células analisadas. A quantidade de células analisadas representa o valor presente no laudo, obtido pelo software Infinicyt™após a remoção de restos e agregados celulares. Resultados: A quantidade de células analisadas foi avaliada em 135 amostras de LCR sem Transfix® e 141 com Transfix®. A mediana de células no grupo sem Transfix® foi de 1.335 células (31 - 998.336 células) e do grupo com Transfix® foi de 1.347 células (20 - 1.000.000 células). Não houve diferença estatística entre os grupos (p = 0,279). Seis amostras sem Transfix® não apresentaram células e outra apresentou apenas quatro células. Já no grupo com Transfix®, não havia células em apenas uma amostra. Discussão: Para prevenir a perda celular que ocorre logo após a coleta do LCR, a técnica da coleta desse material em tubos EDTA/Transfix® tem sido amplamente utilizada com objetivo de detecção de células hematológicas neoplásicas por CF. De acordo com os resultados obtidos no presente estudo, não houve diferença na quantidade de células analisadas na fase pré e pós Transfix®. Porém, na fase pré Transfix® as amostras foram processadas imediatamente após a coleta. Já na fase pós Transfix® foi possível processá-las em até 72h. Essa vantagem traz tranquilidade e organização para o serviço responsável pela coleta e envio ao laboratório, assim como para o setor de CF. Além disso, na fase pré Transfix® houve maior número de amostras com ausência de células, enquanto na fase pós Transfix® este fato aconteceu apenas em uma ocasião. Conclusão: A experiência com o uso do conservante Transfix® para avaliação de LCR por CF tem sido positiva, pois facilita a coleta, o transporte e o processamento dessas amostras.