体外培育牛黄通过调控小胶质细胞极化及炎症小体活性干预脑缺血再灌注损伤

Abstract

目的探讨体外培育牛黄（ICCB）减轻脑缺血再灌注损伤（CIRI）的机制。方法分别构建大脑中动脉阻塞（MCAO）大鼠模型和氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）BV2细胞模型。其中，大鼠模型于脑缺血1.5 h再灌注72 h后进行改良的神经损伤严重程度评分（mNSS），并测定脑组织含水量和脑梗死体积；苏木精-伊红染色法检测大脑皮层及海马CA1区组织结构病理变化；免疫荧光法检测皮层小胶质细胞极化情况和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白（NLRP）3炎症小体的表达情况。BV2细胞于氧糖剥夺0.5 h再灌注24 h后，经ICCB和尼日利亚菌素等药物处理并采用MTT法检测细胞存活率。蛋白质印迹法检测OGD/R细胞中NLRP3/含CARD抗体的凋亡相关斑点样蛋白（ASC）/胱天蛋白酶（caspase）1通路蛋白及炎症因子的表达情况。观察NLRP3特异性激动剂尼日利亚菌素预处理24 h对ICCB改善OGD/R细胞活性、炎症因子以及通路相关蛋白的影响。结果ICCB治疗显著改善大鼠的神经功能，减少脑梗死体积和脑含水量，改善CIRI大鼠皮层和海马CA1区的病理损伤（均P<0.05）。ICCB可刺激大鼠皮层小胶质细胞由M1型向M2型转化，并抑制小胶质细胞中NLRP3的活化（均P<0.01）。ICCB还可以显著降低OGD/R细胞模型中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白的表达以及IL-18和IL-1β炎症因子的分泌（均P<0.01）。此外，NLRP3激动剂尼日利亚菌素可逆转ICCB对模型细胞的保护作用及对炎症因子的调控作用（均P<0.05）。结论ICCB对CIRI具有保护作用，这种保护作用可能与减少小胶质细胞M1型极化、促进其向M2型转化，抑制NLRP3/ASC/caspase-1信号转导从而抑制神经炎症有关。

Keywords

• 脑缺血再灌注损伤
• 体外培育牛黄
• 小胶质细胞
• NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3
• 炎症小体
• SD大鼠