Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban (Jul 2024)
疏血通抑制Bim依赖的小脑颗粒神经元凋亡
Abstract
目的探究疏血通及其主要成分水蛭素对Sprague-Dawley（SD）大鼠小脑颗粒神经元（CGNs）凋亡的影响及机制。方法体外成熟7 d的CGNs分为存活对照组（用含K+浓度为25 mmol/L的培养基，即25 K组）、凋亡组（用含K+浓度为5 mmol/L的培养基，即5 K组）、以1/50、1/40、1/30、1/20、1/10浓度（稀释50、40、30、20、10倍）疏血通注射液处理组（25 K以及5 K合并疏血通处理组）以及对应不同浓度（2 U/mL、2.5 U/mL、3.34 U/mL、5 U/mL、10 U/mL）水蛭素处理组（25 K以及5 K合并水蛭素处理组），用Hoechst染色法观察并统计凋亡率。在蛋白印迹实验中，在25 K和5 K条件下用1/50、1/10浓度疏血通注射液以及对应2 U/mL、10 U/mL浓度水蛭素处理细胞，用Western blot法检测Cleaved Caspase-3、Bim、VEGF的表达水平。结果核染色结果显示，与25 K存活对照组比较，5 K凋亡组凋亡率增加；与25 K存活对照组比较，不同浓度疏血通注射液与水蛭素处理细胞后凋亡率无明显变化；与5 K凋亡组比较，不同浓度疏血通注射液与水蛭素处理细胞后凋亡率下降，且随着浓度的升高，凋亡率下降越明显。Western blot结果显示，与5 K凋亡组比较，不同浓度疏血通与水蛭素处理细胞后Cleaved Caspase-3、Bim蛋白表达水平均下降，VEGF蛋白表达水平升高。结论疏血通及其主要成分水蛭素通过抑制Bim表达，进而抑制线粒体依赖的小脑颗粒神经元凋亡。
