Validación de un método para la determinación de 19-norandrosterona en orina humana por Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas de Trampa de Iones

Abstract

El consumo de nandrolona rinde en el humano tres metabolitos fundamentalmente, 19-norandrosterona (19-NA), 19-noretiocolanolona (19-NE) y 19- norepiandrosterona. Estudios recientes han demostrado la producción endógena de 19-NA a niveles de concentración muy cercana al límite de corte establecido por el Comité Olímpico Internacional, es decir de 2 ng/mL para los hombres y de 5 ng/mL para las mujeres. El metabolito marcador del consumo de ese esteroide es la 19-NA. El presente trabajo trata de la validación cualitativa de un método analítico para su determinación con metiltestosterona como patrón interno que emplea un paso de extracción en fase sólida con columnas DetectabuseÔ, seguida de una hidrólisis enzimática con b-glucuronidasa de E. coli, extracción líquido- líquido, derivatización con N-metil-N-trimetilsililtrifluoroacetamida (MSTFA) para obtener el bis-trimetilsilil derivado de la 19-NA (19-NA bis-O-TMS) y análisis mediante Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas en tándem (CG-EM-EM) utilizando un espectrómetro de masas de trampa de iones. Se utilizó una columna capilar Ultra HP-1 (20 m X 0,20 mm X 0,11 µm), con un programa de temperatura que va desde 181 °C (por 1 min), hasta 210 °C (10 °C/min), entonces hasta 310 °C (20 °C/min), manteniéndose en esa temperatura durante 2 min . El modo de adquisición fue EM-EM con ionización por impacto electrónico seguido de disociación mediante colisión inducida con helio.