Ensaio de potência da alfaepoetina: Comparação de camundongos Swiss Webster, NIH, C57BL/6, BALB/c com o híbrido B6D2F1 /Potency assay of epoetin alpha: Comparison of Swiss Webster, NIH, C57BL/6, BALB/c mice with the hybrid B6D2F1

Abstract

Neste estudo comparamos os resultados de ensaios de potência da alfaepoetina (EPOhr) realizados com camundongos de diferentes colônias e linhagens (Swiss Webster, NIH, C57BL/6 e BALB/c) com aqueles de ensaios conduzidos com o híbrido B6D2F1, o úni-co camundongo recomendado pela Farmacopeia Europeia (FE). Fêmeas de diferentes colônias e linhagens, pesando 16-18 gramas, receberam uma única dose de EPOhr por via subcutânea (30, 90 ou 270 UI/animal, 0,2 mL/camundongo). As potências biológi-cas de apresentações de 4.000 UI/mL da EPOhr foram avaliadas utilizando um material de referência de trabalho de alfaepoetina (3.773 UI/mL) anteriormente testado junto ao padrão de referência internacional BRP (European Pharmacopeia Biological Refe-rence Preparation). Os resultados indicaram que camundongos das colônias e linhagens examinadas atingiram critérios estatísticos (FE) para um ensaio válido de potência da eritropoietina e, portanto, podem ser considerados como alternativas ao uso do híbrido B6D2F1. Os ensaios com camundongos BALB/c, entretanto, foram os que produziram re-sultados mais semelhantes aos obtidos com os híbridos B6D2F1, em relação à contagem média de reticulócitos em resposta a 30, 90 e 270 UI/camundongo, e aos coefi cientes angulares (inclinação) e lineares (intersecção) da curva dose-resposta (curvas paralelas praticamente superpostas). --------------------------------------------------------------------------- In this study we compared the outcomes of epoetin alpha (rhEPO) potency assays per-formed with Swiss Webster, NIH, C57BL/6 and BALB/c mice with those of the assay conducted with the B6D2F1 hybrid, the only mice recommended by the European Phar-macopoeia (EP). Female mice from different breeding stocks and strains, weighing 16-18 g, received a single subcutaneous injection of (30, 90 or 270 IU per mouse, 0.2 mL per mouse) of rhEPO. Biological potencies 4000 IU/mL rhEPO pharmaceutical forms from di-fferent batches were determined using a biological reference preparation (3773 IU/mL) previously tested against the international reference standard BRP (European Pharmaco-poeia Biological Reference Preparation). Results showed that assays with mice from all tested breeding stocks and strains met EP statistical criteria for a valid erythropoietin potency assay and thus they are potential alternatives to the use of B6D2F1 hybrids. The assays with BALB/c mice, however, were those the results of which were most similar to those obtained with the hybrid regarding average reticulocyte counts in response to 30, 90 and 270 IU/mouse, angular (slope) and linear (intersection) coeffi cients of the linear dose-response curve (parallel and almost complete overlapping dose-response curves).

Keywords

• Alfaepoetina; Ensaio de Potência; Bioensaio; Linhagens de Camundongos; Eritropoietina Recombiante Humana (EPOhr)
• Epoetin Alpha; Potency Assay; Bioassay; Mouse Strains; Human Erythropoietin Recombinant (rhEPO)