水溶性番茄浓缩物经自噬途径调控血小板的氧化损伤

Abstract

目的过度氧化应激可促进血小板氧化损伤，从而加快心血管疾病的发生发展。水溶性番茄浓缩物（Fruitflow）具有抑制血小板聚集、活化的作用，但是否通过自噬减轻血小板氧化损伤仍未见报道。本研究拟通过体外实验探讨Fruitflow对过氧化氢（H2O2）导致的血小板氧化损伤的影响及其潜在机制。方法用不同剂量的Fruitflow （0、20、40、80 mg/L）与纯化血小板预孵育30 min，随后加入H2O2共孵育60 min。用流式细胞术测定线粒体膜电位（ΔΨm）去极化的水平；用酶标仪测定活性氧（ROS）生成水平；用Western blot测定p53、phospho-p53、LC3 Ⅱ/Ⅰ、p62的表达水平。结果Fruitflow 显著减轻H2O2导致的血小板ΔΨm 去极化（P<0.05），ROS 生成和p53磷酸化（P < 0.05）。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-Methyladenine，3-MA）可以显著逆转Fruitflow 对H2O2处理血小板ROS生成的抑制作用（P<0.05）。Fruitflow 可以降低静息血小板p62的表达、升高LC3Ⅱ/Ⅰ的比例（P<0.05），也显著升高H2O2处理的血小板LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平（P<0.05）。此外，3-MA显著逆转Fruitflow降低H2O2处理的血小板ΔΨm 去极化的作用（P<0.05）。结论Fruitflow可在体外通过促进血小板自噬，显著减轻H2O2导致的血小板氧化损伤。

Keywords

• 水溶性番茄浓缩物;血小板;氧化损伤;自噬;p53