Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban (Jan 2007)

人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建

  • 张志,
  • 黄宗青,
  • 沈琪,
  • 刘洪涛,
  • 邓英太,
  • 李爱东,
  • 周国强,
  • 汪华侨,
  • 何蕴韶

Journal volume & issue
Vol. 28

Abstract

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[目的]克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。[方法]采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。[结果]人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。[结论]成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒,为进一步进行研究PAH蛋白表达和重组蛋白活性鉴定奠定基础。

Keywords