همسانه‏سازی و تعیین توالی ژن گلیکوپروتئین G ویروس تب بی‏دوام گاوی در اشرشیاکلی

Abstract

تب بی‏دوام گاوی (BEF) یک بیماری ویروسی قابل‌انتقال توسط بندپایان در گاو و گاومیش می‏باشد که در مناطق گرمسیری و نیمه‌گرمسیری آسیا، استرالیا و افریقا پراکنده شده است. در سال‏های اخیر این بیماری در بسیاری از استان‏های ایران نیز شایع شده و موجب بروز خسارت‏های اقتصادی گردیده است. در این مطالعه ژن گلیکوپروتئین G ویروس تب بی‏دوام گاوی پس از تکثیر با واکنش PCR در ناقل pTZ57R/T کلون و تعیین توالی شد. پس از اطمینان از صحت همسانه‏سازی، محصول PCR با استفاده از آغازگر‏های دارای جایگاه برشی آنزیم BamHI تکثیر و به پلاسمید بیانی pMalc2x انتقال داده شد و سپس به سلول‏های پذیرا شده اشرشیاکلی (سویه‏های ‏DH5α و Rosetta) منتقل گردید. غربال‌گری کلونی‏های باکتریایی حاوی پلاسمید نوترکیب با روش PCR و هضم آنزیمی، نشان از ورود موفقیت‏آمیز سازه pMalc2x-G به اشرشیاکلی داشت. این مطالعه اولین گزارش از همسانه‏سازی ژن گلیکوپروتئین G ویروس تب بی‏دوام گاوی در ایران است که می‏تواند پایه‏ای برای تولید واکسن و ساخت کیت تشخیصی الایزا برای این بیماری در مطالعات آینده باشد.

Keywords

• اشرشیاکلی
• تب بی‏دوام گاوی (bef)
• ژن گلیکوپروتئین g
• همسانه‏ سازی