Revista Brasileira de Fruticultura (Jun 2011)
In vitro organogenesis in some citrus species Organogênese in vitro em algumas espécies de cítrus
Abstract
In vitro organogenesis of Citrus was studied for the genotypes Citrus sinensis cv. 'Natal', C. limonia, C. volkameriana, and C. aurantium, with the use of epicotyl segments-derived explants, cultured in MT salts and vitamins medium supplemented with different concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP - 0.0; 0.5; 1.0; 1.5 or 2.0 mg L-1). For the recalcitrant genotypes C. limonia and C. aurantium the in vitro organogenesis was also studied with internodal segments-derived explants, cultured in MT salts and vitamins medium supplemented with 0; 0.5; 1.0; 2.0, or 4.0 mg L-1 of BAP. The efficiency of culture medium supplementation with the combination of BAP (0.0; 1.0, or 2.0 mg L-1) and NAA (1-naphthaleneacetic acid - 0.0; 0.3, or 0.5 mg L-1) in the development of adventitious shoots was evaluated for C. aurantium. Culture medium supplementation with BAP is not essential for the adventitious shoots development in the four genotypes studied when epicotyl segments-derived explants are used. In general, culture media supplementation with BAP decreased the percentage of responsive explants excepted for C. sinensis cv. 'Natal' and C. limonia when the concentrations of 1.5 and 2.0 mg/L were used. The presence of cytokinin, in concentrations up to 2 mg/L, stimulated the in vitro organogenesis when internodal segments-derived explants were used for C. limonia and C. aurantium. For C. aurantium no adventitious shoots developed in explants (internodal segments) cultured in basal culture medium, without BAP supplementation. Although no statistic differences could be detected, culture media supplementation with the combination of BAP and NAA favored the development of adventitious shoots in C. aurantium. The best concentration of NAA varied according to BAP concentration. The results presented herein, show that Citrus in vitro organogenesis depends on the interaction of culture medium composition, explant differentiation level, and genotype.A organogênese in vitro de Cítrus foi estudada para os genótipos Citrus sinensis cv. 'Natal', C. limonia, C. volkameriana e C. aurantium, utilizando-se de segmentos de epicótilo como explante, cultivados em meio de cultura MT suplementado com diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP - 0,0; 0,5; 1,0; 1,5 ou 2,0 mg L-1). Para os genótipos recalcitrantes C. limonia e C. aurantium, a organogênese in vitro também foi estudada, utilizando-se de segmento internodal como explante, cultivado em meio de cultura MT suplementado com 0; 0,5; 1,0; 2,0 ou 4,0 mg L-1 de BAP. A eficiência da suplementação do meio de cultura com a combinação de BAP (0,0; 1,0 ou 2,0 mg L-1) e NAA (0,0; 0,3 ou 0,5 mg L-1) no desenvolvimento de gemas adventícias foi avaliada para C. aurantium. Pode-se verificar que, nos quatro genótipos estudados, a suplementação do meio de cultura com BAP não é essencial para o desenvolvimento de gemas adventícias, quando segmentos de epicótilo são utilizados como explantes. De maneira geral, a suplementação do meio de cultura com BAP diminuiu a porcentagem de explantes responsivos, exceto para C. sinensis cv. 'Natal' e C. limonia, quando as concentrações de 1,5 e 2,0 mg L-1 foram utilizadas. Para C. limonia e C. aurantium, quando segmento internodal foi utilizado como explante, a presença de citocinina em concentrações até 2,0 mg L-1 estimulou a organogênese in vitro. No caso específico de C. aurantium, não ocorreu o desenvolvimento de gemas adventícias em explantes (segmento internodal) cultivados em meio de cultura basal, sem a presença de BAP. Embora não tenham sido detectadas diferenças estatísticas significativas, a suplementação do meio de cultura com a combinação BAP e NAA favoreceu o desenvolvimento de gemas adventícias em C. aurantium. A melhor concentração de NAA variou conforme a concentração de BAP utilizada. Pela análise dos resultados obtidos, pode-se verificar que a eficiência da organogênese in vitro de Cítrus depende da interação da composição do meio de cultura, do nível de diferenciação do explante e do genótipo utilizado.
