RNA干扰下调SPHK1基因表达抑制胃癌细胞增殖

Abstract

【目的】 应用RNA干扰方法下调鞘氨醇激酶1(SPHK1)基因表达,研究SPHK1对胃癌细胞SGC-7901?MGC-803细胞增殖的影响及其可能的作用机制?【方法】 免疫组织化学法检测5对胃癌及癌旁组织的SPHK1蛋白表达量;构建质粒?制备逆转录病毒并感染胃癌细胞株SGC-7901?MGC-803,筛选并鉴定SPHK1-RNAi和对照载体(RNAi-Vector)稳定表达细胞株;MTT法检测胃癌细胞的增殖变化;Western blot法检测SPHK1?p21?p27?Akt?p-Akt?Rb?p-Rb蛋白的表达水平?【结果】 SPHK1蛋白在胃癌组织中过表达;与对照组比较,两株SPHK1-RNAi稳定表达的胃癌细胞SGC-7901?MGC-803中SPHK1表达显著下调,抑制率分别为81.2%?65.1%; SPHK1-RNAi胃癌细胞增殖能力较对照组显著减弱;SPHK1-RNAi胃癌细胞的磷酸化Akt及磷酸化Rb蛋白表达明显降低,而p21?p27的蛋白表达水平明显上调?【结论】 下调SPHK1基因表达能抑制胃癌细胞的增殖,其机制可能与细胞内Akt信号被减弱,细胞周期抑制蛋白p21?p27的表达上调有关?

Keywords

• 鞘氨醇激酶1;胃癌细胞;细胞增殖;Akt