Клиническая онкогематология (Oct 2013)

Модель миелофиброза in vitro с использованием тромболизата человека

  • Е. Н. Булычева,
  • Н. Т. Сиордия,
  • Е. Г. Ломаиа,
  • А. Ю. Зарицкий,
  • П. А. Бутылин

DOI
https://doi.org/10.21320/2500-2139-2013-6-4-365-372
Journal volume & issue
Vol. 6, no. 4

Abstract

Read online

Разработка и изучение модели миелофиброза in vitro — актуальный вопрос, решение которого позволит выявить механизмы развития заболевания и потенциальные мишени для терапии. Целью работы было изучить свойства мезенхимных стволовых клеток (МСК) при их культивировании с использованием тромболизата от пациентов и здоровых доноров. Пациенты и методы. МСК от здоровых доноров и пациентов с первичным миелофиброзом (ПМФ) культивировали на средах с тромболизатом (ТЛ) различной концентрации. Оценивали пролиферативную активность МСК, экспрессию белков внеклеточного матрикса, способность к остеогенной и адипогенной дифференцировке. Концентрацию ростовых факторов (bFGF, VEGF, TGF-b, HGF) в ТЛ от 17 пациентов c ПМФ (n = 14) и постполицитемическим миелофиброзом (n = 3) измеряли с помощью иммуноферментного анализа. Результаты. Пролиферативная активность МСК, культивированных на ТЛ высокой концентрации (10–20 %), статистически значимо не отличалась от контрольных условий. Отношение экспрессии гена коллагена III типа к коллагену I типа было максимальным при использовании 10% ТЛ. Использование ТЛ для культивирования МСК не приводило к изменению их способности к дифференцировке в остеогенном направлении, но при повышении концентрации ТЛ способность к адипогенной дифференцировке снижалась. Концентрации bFGF и VEGF в ТЛ от больных были статистически значимо выше, чем в контрольной группы (в 2,5 и 2,4 раза соответственно; p < 0,01). Концентрация TGF-b и HGF имела тенденцию к повышению, но статистически значимо не отличалась от контрольной группы (p = 0,2). Культивирование МСК на ТЛ от пациентов с миелофиброзом приводило к увеличению их пролиферативной активности. МСК от больных ПМФ в определенной степени усиливали пролиферацию при культивировании на ТЛ по сравнению с МСК от здоровых доноров. Выводы. Культивирование МСК на ТЛ может быть использовано как адекватная модель миелофиброза in vitro, т. к. приводит к профибротическим изменениям клеток стромы костного мозга.

Keywords