Detección de VIH proviral por nested-PCR utilizando metodología casera (in house)

Abstract

En este trabajo se estudió la sensibilidad de un método de detección de VIH proviral basado en una metodología de PCR anidada cualitativa como ayuda diagnóstica para infección por VIH neonatal. Para ello se estudiaron treinta pacientes con serología positiva VIH, con bajo recuento de linfocitos CD4 y, como control de número de copias capaces de detectar, se utilizó la línea linfoidea 8E5. Se amplificó por nested PCR dos regiones específicas del gen gag VIH. Como control de purificación y estado de conservación de la muestra se amplificó una región del gen constitutivo de ¿-globina. En los treinta casos se obtuvo amplificación gen gag de VIH para las dos regiones y para el control de ¿-globina y, para la línea 8E5, se obtuvo positividad para las tres bandas aun en el caso de sólo diez copias de VIH proviral. Se demuestra un alta sensibilidad para esta metodología in house, que la hace apta para su aplicación en diagnóstico pediátrico a un costo accesible para instituciones públicas.