Estudio del comportamiento que presenta la enzima poligalacturonasa en cuatro materailes experimentales de toamate

Abstract

El fruto del toamte (Lycopersicon esculentum), durante su proceso de maduración, sufre numerosos cambios en las sustancias péicas que conforman la paredd celular produciendo una pérdida de lozanía y firmeza que ocasiona su senescencia debido al incremento de la actividad de las enzimas péticas entre las cuales se encuntra la poligalacturonasa (PG). En la Facultad de Ciencias de la Pontificia Universidad Jveriana, en 1996, mediante el uso de la Metodología del Heteroinjerto Bernal (HIB) se obtuvieron cuatro materiales experimentales de tomate denominados experimentalmente T1(Tomate Marglobe X Tomate de Árbol), T2 (Tomate Milano X Altamiza), T3 (Tomate Milano X Maciega) y T4 (Tomate Milano X Altrmuz). Se ha observado que estos tomates tienen la característica de presentar un período de poscosecha más largo al comprarlo con los aprentales maternos. El objetivo de este estudio fue determinar la velocidad enzimática de la poligalacturosa (PG) de los heteroinjertos de toamte y y un tomate comercial (TC) como control en el estado de la maduración rojo. Para la extracción de la enzima PG se empleó el método de Redenbaugh (1993).Los cristales de enzima obtenidos se resuspendieron y las proteínas se cuantificaron espectrofotométricamente a 280 nm por el método Stosheck (1990) hallando valores promedio de 0.850 mg/ml, 0.781 mg/ml,0.747mg/ml, o.750 mg/ml y 0.329 mg/ml para T1, T2, T3, T4 y TC respectivamente. A partir de los extractos de cada heteroinjerto se realizó una electroforesis SDS-PAGE del 12% en donde se observaron cuatro bandas, una de ellas con peso molecular de 44,7 KD que posiblemente corresponde a la isoenzima endo-PG. Posteriormente se midió la actividad enzimática de la PG en los materiales de tomate objeto de estudio espectrofotométricamente por el método de Gross (1982) el cual fue modificado, se halló que una disminusión de actividad del 44.5%, 46%, 28% y 37% respecivamente para T1, T2 T3 y T4 con relación al control TC. Para caracterizar los productos de la relación enzimática de la PG se realizó una cromatografía en capa fina que mostró en los heteroinjertos un monómero correspondiente al ácido galactutónico con mayor intensidad y otros complejos coloreados muy débiles de mayor peso molecular que pueden corresponder a dímeros, trímetros, tetrámetros, etc., esto se debe a que la PG presente en los materiales experimentales no hidrolizó el ácido poligalacturónico en un 100% a diferencia de la PG del tomate control.