Identificación y expresión diferencial del factor de transcripción asociado a microftalmia en corazón y cardiomiocitos aislados de cobayo, posible papel en hipertrofia y en viabilidad

Abstract

Introducción. El factor de transcripción asociado a microftalmia (MITF) regula la expresión de genes específicos y no se conoce su expresión y su función a nivel cardiaco. Objetivo. Identificar la expresión de MITF en corazón y en cardiomiocitos aislados de cobayo, describir cambios morfológicos asociados con su disminución y evaluar niveles relativos de su expresión en cardiomiocitos aislados en condiciones de preacondicionamiento isquémico. Materiales y métodos. El análisis de expresión relativa de la isoforma específica cardiaca, MITF-H, se determinó por PCR en tiempo real semicuantitativa, secuenciación y western blot. La disminución del mRNA de MITF se indujo con un shRNAi específico. El tamaño, el diámetro y número de fibras musculares se evaluó por observación directa microscopía de luz. Resultados. Se amplificó un fragmento de 281 pb de cDNA, el análisis de la secuencia confirmó la identidad del exón 1 y la isoforma H de MITF. La interferencia del mRNA de MITF se asoció con un mayor índice cardiaco (peso corazón/peso corporal 5,46x10-3 vs 4,6x10-3) y un incremento del diámetro de las fibras cardiacas (50,2±16 μm vs 38,7±14,7 μm p<0.05, n= 150). En cardiomiocitos aislados en condiciones de preacondicionamiento isquémico, se observó una expresión relativa mayor de MITF-H, que en miocitos en normoxia y expuestos a lesión por isquemia simulada (ochenta y cien veces más n=5, p< 0,05 n=3). Conclusión. Los resultados sugieren que MITF-H podría estar involucrado en hipertrofia, en la respuesta al estrés por isquemia y en la supervivencia de cardiomiocitos de cobayo.

Keywords

• ischemia, ischemic preconditioning
• myocytes, cardiac
• microphthalmos, heart, gene expression, hypertrophy