تاثیر پروتئین ضد ویروسی گیاه لاله عباسی (MAP) در آلودگی های ناشی از ویروس موزاییک خیار (CMV) و ویروس Y سیب زمینی (PVY) در گیاه Nicotiana benthamiana در شرایط گلخانه

Abstract

چکیده در این تحقیق تلاش شد تا با استفاده از پروتئین ضد ویروسی گیاه لاله عباسی Mirabilis Antiviral Protein (MAP) در شرایط گلخانه علاوه بر کنترل (CMV) Cucumber mosaic virus و (PVY) Potato virus Y ، مکانیسم کنترل کنندگی آن نیز مورد بررسی قرار گیرد. برای این منظور ابتدا MAP از عصاره­ های برگ و ریشه گیاه لاله عباسی جداسازی شد و سپس گیاهچه­ های Nicotiana benthamiana در گلدان­های 50 گرمی کاشته و در مرحله چهار تا شش برگی بصورت مکانیکی توسط ویروس­های CMV-Fny (Acc.no. D00356.1) و PVYº-UK (Acc.no. KY112748) مایه­ کوبی شدند. همچنین مایه­ کوبی PVYº با شته به‌­طور مجزا انجام شد. دو روز قبل و دو روز بعد از مایه ­کوبی گیاهچه ­های گیاه N. benthamiana، MAP به صورت مستقیم و به مقدار µg300 به محیط ریزوسفر در گلدان‌ها اضافه شد. آلودگی گیاه­ های N. benthamiana با هریک از ویروس­ها توسط آزمون Quantitative -ELISA و میزان نسخه‌های ژنی PVYº توسط آزمون Real-time RT-PCR تا 14 روز بعد از مایه­ کوبی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج آزمون الایزا نشان داد تیمار گیاهچه‌های N. benthamiana با MAP باعث کاهش معنی ­دار تیتر هر یک از ویروس­ها تا 14 روز پس از تیمار شده است. نتایج Real-time PCR بیانگر کاهش میزان حضور نسخه‌های ژنوم PVYº تا ۲/۵ برابر در مقایسه با شاهد آلوده بود. همچنین مشخص شد پروتئینMAP به میزان بیشتری باعث کنترل PVYº نسبت به CMV-Fny می شود. نتایج آزمون انتقال با ناقل حاکی از آن بود که MAP موجب کاهش انتقال PVYº با شته نمی ­شود. همچنین وزن­های تر و خشک اندام‌های مختلف و نیز مقدار فنل در گیاهچه ­های N. benthamiana تیمار شده با MAP افزایش نشان دادند.

Keywords

• کلمات کلیدی: پروتپین غیرفعال کننده ریبوزوم
• فاکتور رشدی
• فعالیت ضد ویروسی
• mirabilis jalapa
• map