Estandarización de los métodos electroforéticos en geles de poliacrilamida en el Phast System y cromatográficos para la caracterización de nuevos antígenos vacunales y componentes de medios de cultivo

Abstract

En este trabajo se realizó un análisis de diferentes parámetros que caracterizan la estandarización para la determinación del tamaño molecular de nuevos antígenos de interés vacunal, a través de electroforesis en “Phast System” y de distintas matrices cromatográficas. La evaluación electroforética de la linealidad en las curvas de patrones indicó valores de coeficientes de correlación y determinación superiores a 0,98, con una adecuada repetibilidad; no se manifestaron diferencias entre los resultados obtenidos por varios analistas, en días diferentes y el método resultó ser exacto y robusto en las condiciones recomendadas. Se evaluaron los parámetros que caracterizan la eficiencia en el empaquetamiento de cuatro matrices cromatográficas (Superosa 12, Sephacryl S-100, Sepharosa CL- 4B y Sephacryl S-1000). Los resultados obtenidos para ambos sistemas de determinación permitieron la evaluación satisfactoria de muestras de proteínas de membrana externa y lipopolisacárido, procedentes de Vibrio cholerae, Leptospira ssp, Pseudomona aeruginosa y Shigella ssp

Keywords

• Estandarización
• electroforesis
• cromatografía
• Vibrio cholerae
• Leptospira ssp
• Pseudomona aeruginosa
• Shigella ssp