Chemical and Pharmacological Screening of <i>Rhinella icterica</i> (Spix 1824) Toad Parotoid Secretion in Avian Preparations
Raquel Soares Oliveira,
Bruna Trindade Borges,
Allan Pinto Leal,
Manuela Merlin Lailowski,
Karla de Castro Figueiredo Bordon,
Velci Queiróz de Souza,
Lúcia Vinadé,
Tiago Gomes dos Santos,
Stephen Hyslop,
Sidnei Moura,
Eliane Candiani Arantes,
Alexandre Pinto Corrado,
Cháriston A. Dal Belo
Affiliations
Raquel Soares Oliveira
Laboratório de Neurobiologia e Toxinologia, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (PPGCB), Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA), Avenida Antônio Trilha 1847, São Gabriel RS 97300-000, Brazil
Bruna Trindade Borges
Laboratório de Neurobiologia e Toxinologia, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (PPGCB), Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA), Avenida Antônio Trilha 1847, São Gabriel RS 97300-000, Brazil
Allan Pinto Leal
Laboratório de Neurobiologia e Toxinologia, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (PPGCB), Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA), Avenida Antônio Trilha 1847, São Gabriel RS 97300-000, Brazil
Manuela Merlin Lailowski
Laboratório de Biotecnologia de Produtos Naturais e Sintéticos, Instituto de Biotecnologia, Universidade de Caxias do Sul (UCS), Rua Francisco Getúlio Vargas 1130, Caxias do Sul RS 95070-560, Brazil
Karla de Castro Figueiredo Bordon
Departamento de Ciências BioMoleculares, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo (USP), Avenida do Café, s/n, Ribeirão Preto SP 14.040-903, Brazil
Velci Queiróz de Souza
Laboratório de Neurobiologia e Toxinologia, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (PPGCB), Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA), Avenida Antônio Trilha 1847, São Gabriel RS 97300-000, Brazil
Lúcia Vinadé
Laboratório de Neurobiologia e Toxinologia, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (PPGCB), Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA), Avenida Antônio Trilha 1847, São Gabriel RS 97300-000, Brazil
Tiago Gomes dos Santos
Laboratório de Estudos em Biodiversidade Pampiana, Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA), Avenida Antônio Trilha 1847, São Gabriel RS 97300-000, Brazil
Stephen Hyslop
Departamento de Farmacologia, Faculdade de Ciências Médicas, Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP), Rua Tessália Vieira de Camargo, 126, Cidade Universitária Zeferino Vaz, Campinas SP 13083-887, Brazil
Sidnei Moura
Laboratório de Biotecnologia de Produtos Naturais e Sintéticos, Instituto de Biotecnologia, Universidade de Caxias do Sul (UCS), Rua Francisco Getúlio Vargas 1130, Caxias do Sul RS 95070-560, Brazil
Eliane Candiani Arantes
Departamento de Ciências BioMoleculares, Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo (USP), Avenida do Café, s/n, Ribeirão Preto SP 14.040-903, Brazil
Alexandre Pinto Corrado
Departamento de Farmacologia, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo (USP), Avenida Bandeirantes 3900, Ribeirão Preto SP 14040-030, Brazil
Cháriston A. Dal Belo
Laboratório de Neurobiologia e Toxinologia, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (PPGCB), Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA), Avenida Antônio Trilha 1847, São Gabriel RS 97300-000, Brazil
The biological activity of Rhinella icterica parotoid secretion (RIPS) and some of its chromatographic fractions (RI18, RI19, RI23, and RI24) was evaluated in the current study. Mass spectrometry of these fractions indicated the presence of sarmentogenin, argentinogenin, (5β,12β)-12,14-dihydroxy-11-oxobufa-3,20,22-trienolide, marinobufagin, bufogenin B, 11α,19-dihydroxy-telocinobufagin, bufotalin, monohydroxylbufotalin, 19-oxo-cinobufagin, 3α,12β,25,26-tetrahydroxy-7-oxo-5β-cholestane-26-O-sulfate, and cinobufagin-3-hemisuberate that were identified as alkaloid and steroid compounds, in addition to marinoic acid and N-methyl-5-hydroxy-tryptamine. In chick brain slices, all fractions caused a slight decrease in cell viability, as also seen with the highest concentration of RIPS tested. In chick biventer cervicis neuromuscular preparations, RIPS and all four fractions significantly inhibited junctional acetylcholinesterase (AChE) activity. In this preparation, only fraction RI23 completely mimicked the pharmacological profile of RIPS, which included a transient facilitation in the amplitude of muscle twitches followed by progressive and complete neuromuscular blockade. Mass spectrometric analysis showed that RI23 consisted predominantly of bufogenins, a class of steroidal compounds known for their cardiotonic activity mediated by a digoxin- or ouabain-like action and the blockade of voltage-dependent L-type calcium channels. These findings indicate that the pharmacological activities of RI23 (and RIPS) are probably mediated by: (1) inhibition of AChE activity that increases the junctional content of Ach; (2) inhibition of neuronal Na+/K+-ATPase, leading to facilitation followed by neuromuscular blockade; and (3) blockade of voltage-dependent Ca2+ channels, leading to stabilization of the motor endplate membrane.
