El objetivo de este estudio fue comparar los resultados de las pruebas de aptitud física entre grupos de posición de juego de jugadores de fútbol americano universitarios y analizar la asociación del porcentaje de la masa magra con las pruebas de aptitud física. Se evaluó a 87 jugadores de fútbol americano la masa magra y siete pruebas de aptitud física. Se encontraron diferencias entre los linieros, jugadores grandes de habilidad y jugadores de habilidad (p ≤ .001) en las pruebas de aptitud física. Se hallaron asociaciones negativas en las pruebas de rapidez y agilidad (p ≤ .001), y asociaciones positivas en las pruebas de fuerza y salto (p ≤ .001) con la masa magra. Los linieros fueron los de menor masa magra y más lentos en las pruebas físicas; y los jugadores de habilidad son los que representan mejores valores de masa magra con mejores resultados en las pruebas físicas.