Identification of Exonic Copy Number Variations in Dystrophin Gene Using Mlpa / Identificarea Variaţiilor Numărului de Copii în Gena Distrofinei Folosind Metoda Mlpa

Abstract

Distrofiile musculare Duchenne şi Becker (DMD/BMD) sunt boli musculare progresive legate de X determinate de mutaţii în gena distrofinei (DMD). Multiplex Ligation - Dependent Probe Amplification (MLPA) este o metodă simplă, necostisitoare şi precisă pentru diagnosticul molecular al mutaţiilor genei DMD. Ea identifică variaţiile numărului de copii în gena distrofinei, dar trebuie completată cu secvenţierea genei în cazul identificării deleţiilor/duplicaţiilor unui singur exon. Scopul acestui studiu a fost de a evalua eficienţa MLPA ca test de screening al mutaţiilor în gena DMD la indivizii afectaţi şi femeile purtătoare, dar şi de a aprecia frecvenţa diferitelor tipuri de mutaţii şi de a verifica valabilitatea “regulii cadrului de lectură. Am folosit MLPA pentru detectarea deleţiilor/ duplicaţiilor în gena DMD la 53 indivizi (30 băieţi afectaţi şi 23 rude asimptomatice de sex feminin) trimişi pentru evaluare şi sfat genetic datorită suspiciunii clinice de DMD/BMD. La băieţii afectaţi (21 DMD şi 9 BMD) MLPA a avut o rată de detecţie de 63,5% (53,5% deleţii şi 10% duplicaţii). Cel mai frecvent deletat exon a fost exonul 45 şi cea mai frecventă duplicaţie a implicat exonii 3-5, confirmând prezenţa celor două regiuni critice mutaţionale raportate în literatură. Mutaţiile detectate în studiul nostru au avut o localizare uşor diferită comparativ cu datele din literatură. Regula cadrului de lectură a fost valabilă în 84% din cazuri.

Keywords

• duchenne and becker muscular dystrophies;dystrophin;mlpa;deletions/duplications
• distrofii musculare duchenne şi becker;distrofină;mlpa;deleţii/duplicaţii