تهیه و ارزیابی نانوپارتیکلهای کایتوزان حاوی توکسوئید دیفتری بعنوان حاملی جدید جهت آزادسازی واکسن داخل بینی در موش سوری

Abstract

هدف از این تحقیق ارزیابی امکان تهیه و کاربرد نانوپارتیکلهای کایتوزان و مشتق شیمیایی با پلی اتیلن گلایکول (PEG) بعنوان حاملهای نوین در آزاد سازی داخل بینی واکسنها می باشد. برای این منظور توکسوئید دیفتری بعنوان یک مدل آنتی ژنی انتخاب گردید. آنتی ژن دیفتری با استفاده از روش کراس لینک یونی در درون نانوپارتیکلهای کایتوزان و کایتوزان با PEG محبوس گردیدند. نانوپارتیکلهای حاوی توکسوئید دیفتری پس تهیه از نظر اندازه، بار الکتریکی سطحی، کارآیی احتباس و رهایش آنتی ژن فعال در محیط برون تن مورد ارزیابی قرار گرفتند. به منظور بررسی کارآیی نانوپارتیکلها بعنوان حامل مناسب برای واکسن از طریق داخل بینی به موشهای هوشیار تجویز گردیدند. نتایج نشان داد که نانوپارتیکلهای بدست آمده براساس شرایط فرمولاسیون و مشتق سازی کایتوزان با PEG دارای اندازه ذره ای متغییر بین nm 100-500 می باشند. این ذرات همچنین دارای بار الکتریکی سطحی مثبت (حدوداً mV 40) بودند. انجام مشتق سازی بر روی کایتوزان با PEG سبب کاهش بار الکتریکی سطحی نانوپارتیکل تا حدود mV 10 می گردد. این ذرات همچنین (بر اساس شرایط فرمولاسیون) دارای کارآیی احتباس بین 50-100% برای توکسوئید دیفتری می باشند. نتایج آزاد سازی در برون تن نشان دهنده آزادسازی دو فازی می باشد که شدت آزادسازی اولیه برای نانوپارتیکلهای تهیه شده از مشتق PEG کایتوزان کمتر از کایتوزان معمولی می باشد. تجویز داخل بینی این نانوپارتیکلها سبب تحریک و افزایش سطح ایمنی هومورال (سطح IgG) نسبت به نمونه محلول توکسوئید گردید. همچنین پاسخ ایمنی مخاطی (سطح IgA)، 70 روز پس از اولین دز تجویز شده، بطور معنی داری برای نانوپارتیکلهای حاوی توکسوئید دیفتری بالاتر از نمونه محلول توکسوئید دیفتری بود. نتیجه جالب بدست آمده این بود که سطح پاسخ ایمنی بدست آمده تحت تاثیر وزن مولکولی کایتوزان قرار ندارد اما انجام مشتق سازی کایتوزان با PEG بشدت پاسخهای ایمنی را متاثر می نماید. از اینرو بنظر می رسد که کایتوزان و مشتق PEG آن حامل مناسبی برای ایمنی زاسیون داخل بینی باشد.

Keywords

• کایتوزان
• نانوپارتیکلها
• پلی اتیلن گلایکول
• واکسن
• تجویز داخل بینی