جداسازی، تکثیر و تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی جنینی موش صحرایی به رده‌ی سلول‌های استئوژنیک و آدیپوژنیک

Abstract

مقاله پژوهشیمقدمه: توده‌ی بدن جنین، منبع بسیاری از سلول‌های بنیادی است که پتانسیل زیادی در ترمیم و بازسازی بافت‌های مختلف دارند و می‏توانند به انواعی از سلول‌ها از جمله استئوبلاست و آدیپوسیت تمایز یابند. با این حال جداسازی و توان تمایزی این سلول‌ها در محیط کشت، کمتر بررسی شده است. لذا هدف از مطالعه‌ی حاضر، تعیین روش جداسازی، تکثیر و توان تمایزی سلول‏های بنیادی مزانشیمی جنینی (fMSCs) مشتق شده از جنین موش صحرایی بود.روش‌ها: در این مطالعه‌ی تجربی، fMSCsها با استفاده از روش هضم با تریپسین، از جنین‌های 15 روزه موش صحرایی جداسازی و تا پاساژ سوم کشت داده شدند. سپس، ماهیت fMSCها با فلوسایتومتری مشخص شدند و به رده‌ی سلول‌های استئوبلاست و آدیپوسیت تمایز داده شدند. تکثیر سلولی و بیان ژن‌های اختصاصی رده‌ی استئوژنیک و آدیپوژنیک در سلول‌های تمایز یافته مورد بررسی قرار گرفت.یافته‌ها: مارکرهای سطح سلولی fMSCها در پاساژ ۳ برای CD105 و CD90 مثبت و برای CD45 و CD34 منفی بودند. سلول‌های جدا شده مورفولوژی فیبروبلاست مانندی را نشان دادند. این سلول‌ها، رسوب کلسیم را در تمایز به استئوژنیک و تجمع قطرات چربی در تمایز به آدیپوژنیک داشتند. ژن‌های رده‌ی استئوژنیک شامل استئونکتین، ALP، BMP-6، Runx-2 و ژن‌های رده‌ی آدیپوژنیک شامل PPARγ و CREBBP به ترتیب در کشت تمایز استئوژنیک و آدیپوژنیک بیان شدند.نتیجه‌گیری: با توجه به یافته‌های مطالعه‌ی حاضر به نظر می‌رسد که سلول‌های بنیادی مزانشیمی جدا شده با استفاده از روش هضم آنزیمی با تریپسین از جنین موش صحرایی، دارای توان بالقوه‌ای در تکثیر و تمایز به رده‌ی سلول‌های استئوبلاست و آدیپوسیت هستند.

Keywords

• سلول‌های بنیادی مزانشیمی
• آدیپوسیت‌ها
• استئوبلاست‌ها
• جنین