Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo (Dec 1992)
Serological, electrophoretic and biological properties of Fasciola hepatica antigens Propiedades serologicas, electroforeticas y biologicas de antigenos de Fasciola hepatica
Abstract
Fasciola hepatica somatic antigen, its partially purified fractions and excretion-secretion products were investigated as to serological, electrophoretic and biological properties. In a Sephadex G-100 column (SG-100), Fasciola hepatica total antigen (FhTA) gave 5 fractions, and SDS-PAGE analysis showed they were glycoproteins ranging from 14 to 94 kDa molecular weight (MW). When these fractions were analyzed by enzyme linked immunotransfer blot (EITB) and immunodiffusion in gel (ID) with serum from immunized rats with FhTA, the presence of different antigenic components was revealed. In the SDS-PAGE of excretor-secretor antigen (ESA), it was possible to observe peptides from 12 to 22 kDa, which were also present in FhTA. When the FhTA, its fractions and the ESA were analyzed by EITB with the immune rat serum (IRS), it was observed that only some fractions of the SG-100 shared antigens with the FhTA and ESA. Moreover, DTH and ITH responses were studied in FhTA immunized rats challenged with these different antigen components, revealing that the protein/carbohydrate ratio is important for inducing DTH response. The ESA was the most active component in the DTH and ITH response.Se realizó la purificación parcial de un antigeno somático de Fasciola hepatica y se obtuveron los productos de excreción-secreción. Por filtración del antigeno total de Fasciola hepatica en Sephadex G-100 (SG-100), se obtuvieron 5 fracciones las que al ser analizadas por electroforesis en geles de poliacrilamida, demostraron estar constituidas por glicoproteínas con un rango de peso molecular (PM) entre 14 y 94 kDa. Cuando estas fracciones fueron analizadas por immunoblot e inmunodifusión en geles de agar frente al suero de ratas inmunizadas con el homogenato total se reveló la presencia de diferentes componentes antigénicos. Usando un antígeno excretor-secretor fue posible observar en el perfil electroforético la presencia de péptidos con un PM entre 12 y 22 kDa, los cuales también estan presentes en el antígeno total. Cuando el antígeno total, sus fracciones y los productos de excreción-secreción fueron analizados por immunoblot frente a suero de rata inmune, se pudo demostrar que algunas fracciones obtenidas por filtración en SG-100 comparten antígenos con el homogenato total y el excretor-secretor. Por otra parte, cuando se estudio la respuesta de hipersensibilidad demorada e inmediata en ratas inmunizadas con el antígeno total, y desafiadas con los distintos componentes antigénicos se observó que la proporción proteínas/carbohidratos de cada fracción es importante en la inducción de la respuesta inmune celular. El antígeno excretor-secretor demostró ser el componente mas activo en ambos tipos de respuesta.
Keywords
