Archives of Razi Institute (Apr 2015)
مطالعه مولکولی PCR-RELP برای شناسایی آلودگی تیلریا آنولاتا در گاو و گونه های هیالوما در استان کرمانشاه
Abstract
تیلریوزیس گاوی بیماری مهم نواحی گرمسیری و نیمه گرمسیری است که خسارات اقتصادی قابل توجهی به صنعت دامپروری ایران وارد میکند. هدف از این مطالعه ارزیابی فراوانی عفونت تیلریا در گاو و گونه های هیالوما در استان کرمانشاه بود. تعداد 138 نمونه خون گاو به صورت تصادفی جمع آوری شد. آنولاتاDNA ژنومی تیلریا آنولاتا استخراج گردید و قطعه ای به اندازه bp721 از توالی ژن تحت واحد rRNA کد کننده آنتی ژن سطحی مروزوئایت 30 کیلو دالتون (30 KDa msa) تکثیر شد. محصول تکثیر شده توسط آنزیم های محدود کننده TaqI، Rasl و AluIهضم شدند. شیوع کلی 44/9درصد (138/13) در گاوهای نژاد هلشتاین کمتر از یک سال و بیش از 5 سال به ترتیب لمفادنوپاتی (17/1درصد) و رنگ پریدگی مخاط (9/1درصد) بود. پنج گونه کنه سخت از جنس هیالوما (8/18درصد، 750 : 141) شامل گونه های هیالوما آناتولیکم آناتولیکم (4/30درصد)، هیالوما آناتولیکم اکسکاواتوم (2/31درصد)، هیالوما مارژیناتوم (8/36درصد)، هیالوما آسیاتیکم آسیاتیکم (7/0درصد) و هیالوما دتریتوم (7/0درصد) شناسایی شدند. شاخص تعداد کنه برای گونه های هیالوما دارای دامنه 01/0 تا 36/0 بود. واکنش زنجیره ای پلی مراز نشان داد که 3 نمونه از 138 نمونه خون (17/2 درصد) و 19 کنه از 141 کنه هیالوما آلوده به تیلریا آنولاتا بودند. هضم محصول واکنش زنجیره ای پلی مراز نمونه های خون الگوی RFLP هضم آنزیمی مشابهی داشتند، ولی الگوی RFLP برای تیلریا آنولاتا از کنه های هیالوما آناتولیکم آناتولیکم (21/9 درصد)و هیالوما آناتولیکم اکسکاواتوم (2/4 درصد) متفاوت بود. الگوی RFLP قطعه تکثیری ژن 30 KDa msa تیلریا آنولاتا بیانگر وجود چهار جدایه مختلف تیلریا آنولاتا از گونه های هیالوما آناتولیکم آناتولیکم و هیالوما آناتولیکم اکسکاواتوم در منطقه بود.
Keywords
