Revista Ciência Agronômica (Sep 2012)
Tissue culture techniques in the proliferation of shoots and roots of Calendula officinalis Utilização de técnicas de cultura de tecidos na proliferação de brotos e enraizamento de Calendula officinalis
Abstract
The high demand for plant material from Calendula officinalis in the production of herbal medicines and cosmetics, turns the technique of plant-tissue culture into one of the alternatives for the improvement of crops over a short period of time. A protocol for tissue culture was developed from segments of seedlings of C. officinalis, in order to improve the proliferation of shoots and roots. We used a Murashige and Skoog (MS½N) medium, reduced to half the concentrations of NH4NO3 and KNO3 to verify the effect of different types of explants (basal, intermediate, and apical), a medium containing beach sand as support instead of agar, and the effect of auxins and cytokinins (TDZ tidiazuron; BAP, 6-benzylaminopurine, IAA, indol-3-acetic acid, IBA, indol-3-butyric acid, NAA, naphthalene-acetic acid) on plant development in vitro. The results showed pronounced rooting from the apical explants, as well as a greater elongation of shoots and number of leaves. The solid medium was more suitable for the C. officinalis cultures. Shoot proliferation was dependent on cytokinins with better results from the influence of TDZ or BAP compared to the other treatments. Plants regenerated from the medium containing TDZ displayed a glazed appearance and morphogenetic deformations. The highest rate for rooting (80%) was obtained using IAA 0.1mgL-1. Through in-vitro propagation, healthy C. officinalis plants were obtained with roots which can acclimatise, allowing the continuous supplement of raw material.A alta demanda por material vegetal de Calendula officinalis para produção de fitoterápicos e cosméticos, configura a técnica de cultura de tecidos vegetais como uma das alternativas para o aprimoramento das culturas em curto período de tempo. Um protocolo de cultura de tecidos foi desenvolvido a partir de segmentos de plântulas de C. officinalis, no intuito de melhorar a proliferação de brotos e o enraizamento. Foi utilizado o meio Murashige e Skoog (MS½N) reduzido à metade das concentrações de NH4NO3 e KNO3, para verificar o efeito de diferentes tipos de explantes (basal, intermediário e apical), meio contendo areia de praia como suporte em substituição do agar, e o efeito de citocininas e auxinas (TDZ, tidiazuron; BAP, 6-benzilaminopurina; AIA, ácido indol-3-acético; AIB, ácido indol-3-butírico; ANA, ácido naftaleno acético) no desenvolvimento vegetal in vitro. Os resultados mostraram pronunciado enraizamento a partir dos explantes apicais, e também maior alongamento dos brotos e número de folhas. O meio sólido foi mais apropriado para as culturas de C. officinalis. A proliferação de brotos mostrou-se dependente de citocininas, com melhores resultados sob efeito de TDZ ou BAP em relação aos outros tratamentos. As plantas regeneradas a partir do meio contendo TDZ apresentaram aspecto vitrificado e deformações na morfogênese. A maior taxa de enraizamento (80%) foi obtida utilizando AIA 0.1 mg L-1. Através da propagação in vitro foram obtidas plantas de C. officinalis saudáveis e com raízes, capazes de serem aclimatizadas, e permitindo contínuo suplemento de matéria-prima.
Keywords
