افزایش حساسیت کیت الایزای گلیکوپروتئین مرتبط با آبستنی به‌منظور تشخیص سریع‌تر آبستنی در گاو شیری

Abstract

تشخیص سریع آبستنی یکی از فاکتورهای کلیدی مؤثر در افزایش بازدهی تولید­مثل در گاوهای شیری است. گلیکوپروتئین­های مرتبط با آبستنی توسط جفت گاوهای آبستن تولید و تراوش می­شوند و در سال­های اخیر در تشخیص آبستنی گاو مورداستفاده قرارگرفته‌اند. با توجه به محدود شدن روش سونوگرافی و سایر روش­های مورداستفاده به حدود روز 30 پس از تلقیح، هدف از این پژوهش کاهش زمان تشخیص آبستنی با استفاده از نانو­کیت تشخیص گلیکوپروتئین مرتبط با آبستنی بود. برای این منظور، یک نانو­کیت الایزای ساندویچی برای تشخیص گلیکوپروتئین­های مرتبط با آبستنی طراحی و ساخته شد. نانوذرات مگنت به‌منظور افزایش سطح تماس بین آنتی­بادی و آنتی­ژن مورداستفاده قرار گرفت و از ویژگی میل اتصال­پذیری بالا بین استرپتاویدین و بیوتین برای اتصال آنتی­بادی به نانوذرات استفاده شد. در این پژوهش تعداد 58 گاو شیری نژاد هلشتاین انتخاب و تکنیک همزمان­سازی و تلقیح مصنوعی انجام شد. نمونه­های خون گاوها از روز 18 تا 30 پس از تلقیح روزانه جمع­آوری و پس‌از انتقال به آزمایشگاه نمونه­های پلاسمای خون جداسازی شد و وضعیت آبستنی در روز 30 و 60 آبستنی به ترتیب با استفاده از سونوگرافی و لمس راست‌روده بررسی شد. غلظت گلیکوپروتئین­های مرتبط با آبستنی در نمونه­های پلاسما با استفاده از نانوکیت اندازه­گیری و با استفاده از نرم‌افزار SAS آنالیز شد. نتایج نشان داد، غلظت گلیکوپروتئین­ها از روز 21 تا 30 پس از تلقیح به‌صورت وابسته به روز در گاوهای آبستن افزایش می­یابد. همچنین اولین افزایش چشمگیر در غلظت گلیکوپروتئین­ها در روز 23 پس از تلقیح مشاهده شد و گاوهایی که تا روز 60 پس از تلقیح آبستن تشخیص داده شدند، در روز 24 پس از تلقیح غلظت گلیکوپروتئین بیشتری در مقایسه با گاوهای غیرآبستن داشتند (به ترتیب ng/ml 15/0±28/2 و 18/0±7/0) .بر اساس این نتایج، غلظت گلیکوپروتئین در روز 24 آبستنی می­تواند نشانه­ای زودهنگام از وضعیت آبستنی در گاوهای شیری باشد. بااین‌حال، مطالعات بیشتری لازم است تا کارایی این روش تأیید شود.

Keywords

• آبستنی
• سقط جنین
• گاو شیری
• گلیکوپروتئین
• نانوکیت