Identificación molecular de mutaciones puntuales relacionadas con resistencia a drogas en VIH-1 de pacientes peruanos

Abstract

Objetivo: Identificar mutaciones puntuales relacionadas con resistencia a drogas en VIH-1 de pacientes peruanos. Materiales y metodos: Se seleccionaron 11 muestras de VIH provenientes de sangre total de sujetos con tratamiento antirretroviral (ARV). Posteriormente se realizo la optimizacion de la amplificacion de 337 pb del gen de la transcriptasa reversa (tr) y 377 pb de todo el gen de la proteasa (prt). Los productos de PCR fueron secuenciados directamente para el analisis de mutaciones de resistencia. Las secuencias finales fueron analizadas en programas de analisis de mutaciones de la HIV Drug Resistance Database de la Universidad de Stanford. mutaciones de la HIV Drug Resistance Database de la Universidad de Stanford. Resultados: La optimizacion de la concentracion de ADN (2,5 ng / µL) asi como la concentracion de magnesio (4 mM) fueron factores criticos para la amplificacion de la tr y la prt respectivamente. De otro lado, el analisis de secuencia revelo la presencia de las mutaciones T215Y y la M184V en tr, implicadas en conferir resistencia a zidovudina (AZT) y estavudina (D4T) asi como a lamivudina (3TC) y emtricitabina (FTC) respectivamente. En prt se observaron las mutaciones D30N y N88D implicadas en conferir resistencia a nelfinavir (NFV). Es importante senalar que solo tres muestras de VIH-1 presentaron mutaciones de resistencia, las demas mostraron mutaciones compensatorias. Conclusiones: Se demuestra la existencia de mutaciones de resistencia a ARV a nivel de tr y prt de VIH-1 en sujetos peruanos que reciben terapia TARGA. Se requieren de mayores estudios para establecer un perfil de resistencia a ARV en la poblacion peruana.

Keywords

• VIH
• Mutacion puntual
• Transcriptasa reversa
• Proteasa
• Genotipificacion