Validação de método espectrométrico para quantificação de um derivado de N-acilhidrazona

Abstract

O desenvolvimento de métodos de quantificação é de extrema importância para o controle de qualidade de insumos farmacêuticos ativos, principalmente quando são de moléculas recém-sintetizadas. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar um método analítico para quantificação do composto N’-((1H-indol-3il)metileno)-2-cianoacetohidrazida (JR-19). O método foi baseado na espectrometria UV como técnica analítica. Para obtenção dos espectros de absorção, foi utilizado espectrofotômetro Shimadzu UV-1280, na faixa de 190 nm a 350 nm, utilizando DMSO como solvente, e a validação foi realizada seguindo os parâmetros preconizados pelas normas RDC 166, ISO 17025 e DOQ-CGCRE-008. O comprimento de onda de máxima absorção foi de 311 nm. Em relação ao estudo de estabilidade de 8 horas, foi possível identificar que a solução fica estável a partir de 60 minutos. Para estabilidade das soluções por 14 dias, ficou demonstrado que a solução armazenada em temperatura ambiente, com ou sem proteção da luz, permanece estável. O método seguiu o processo de validação a partir da linearidade, faixa linear de trabalho, limites de detecção e de quantificação, precisão intermediária, exatidão e robustez. O método desenvolvido seguiu curva de calibração de 2,00 a 17,00 µg.mL-1, com coeficiente de correlação de 0,991 e regressão significativa e sem falta de ajuste a partir da Análise de Variância. Também foi observado que os resíduos possuem distribuição normal com os dados homocedásticos, demonstrando a significância estatística da curva ajustada. Os limites de detecção e quantificação foram 0,58 e 1,77 µg.mL-1, respectivamente. O método desenvolvido apresentou coeficientes de variação inferiores a 5% a partir do estudo de precisão intermediária. A exatidão foi avaliada a partir de teste de recuperação, obtendo-se um valor médio de 93,74%. A robustez do método foi avaliada a partir de duas distintas marcas de solventes e dois comprimentos de onda ao redor do obtido no modelo desenvolvido, e não foram observadas diferenças significativas nos resultados. Em conclusão, o método desenvolvido para determinação quantitativa da molécula JR-19 atendeu aos requisitos de qualidade preconizados pelas normas nacionais nos parâmetros estudados para validação.

Keywords

• calibração univariada
• controle de qualidade
• espectrometria uv
• quantificação
• regressão linear