siRNA对VEGFR2的表达抑制及对HL60细胞和人内皮细胞的影响

Abstract

【目的】为探索治疗白血病的新思路研究了小干扰RNA（siRNA）对肿瘤细胞株HL60和人血管内皮细胞（EC）株EA·hy926血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）基因表达的抑制作用。【方法】制备并筛选VEGFR2基因的最有效siRNA，并据此设计shRNA寡核苷酸链，构建pENTR^TM／U6干扰表达载体。瞬时转染细胞．采用MTF法、RT-PCR法及Western blot测定VEGFR2表达抑制情况。【结果】VEGFR2 siRNAa、b、c抑制HL60细胞效率分别为77．5％、45．0％、80．9％，以siRNAc最高，利用其shRNA和pENTR^TM／U6构建的入门克隆转染HL60，抑制细胞效率达99．1％；此入门克隆对VEGF＆基因mRNA和蛋白的表达抑制在HL60和EA·hy926细胞均显著。【结论】在体外shRNA表达载体可有效抑制HL60细胞VEGFR2自分泌和旁分泌，有效抑制白血病细胞生长。

Keywords

• siRNA
• VEGFR2
• HL60细胞
• EC