Revista Ciencias Biomédicas (Dec 2010)
Mycoplasmas detection in cells cultures
Abstract
INTRODUCTION. Cells cultures are widely used in both biomedical and biotechnological research centers and industry, as well as for diagnostic test in hospitals. Contaminations of cells cultures with microbial organisms as well as with virus or other eukaryotic cell lines are a major problem in cell culture related research.OBJECTIVE. Mycoplasmas detection in cells cultures came from biomedical laboratories.MATERIAL AND METHODS. The cells cultures screened for mycoplasmas by using of microbiological culture and PCR. Cells cultures were grown in the absence of antibiotics for 3-4 days. The identified based on alterations in the pH of the broth in the absence of turbidity, production of fried egg colonies. Comparison between microbiological and PCR were made using Student T test.RESULTS. Mycoplasmas were detected by culture in 9/20 (45%) of the cell culture samples and PCR revealed the presence of target DNA in 10/20 (50%) samples. Mycoplasmas detection between the microbiological culture and PCR showing not significant differences (P>0.05).CONCLUSION. Mycoplasmas detection in cell cultures must be strengthen with another technique to validate the results.RESUMENINTRODUCCIÓN. Los cultivos celulares se utilizan frecuentemente en la investigación biomédica, en el área industrial y en pruebas diagnósticas en los hospitales. La contaminación de los cultivos celulares por microorganismos o por contaminación cruzada entre cultivos es uno de los principales problemas en la investigación.OBJETIVO. Detección de micoplasmas en cultivos celulares provenientes de diferentes laboratorios biomédicos.MATERIAL Y METODOS. Los cultivos celulares se evaluaron para detectar presencia de micoplasmas por medio de cultivo microbiológico y PCR. Los cultivos celulares fueron crecidos en ausencia de antibióticos durante 3-4 días. La identificación se presentó por el cambio en el indicador de pH y ausencia de turbidez en el caldo y por la presencia en agar de las colonias características a través de microscopia estereoscópica. La comparación de los resultados obtenidos entre el método microbiológico y PCR se realizó con la prueba de T de Student.RESULTADOS. Por el método microbiológico se detectó en 9/20 muestras (45%) presencia de micoplasmas en los cultivos celulares y por medio de la prueba de PCR resultaron positivas 10/20 muestras (50%) de cultivos celulares. El análisis estadístico mostró que no hay diferencia significativa (P>0.05) en la detección entre el método microbiológico y PCR.CONCLUSIONES. Es recomendable que la detección de micoplasmas en cultivos celulares debe reforzarse con otra técnica para validar los resultados.
