Revista Colombiana de Biotecnología (Feb 2007)
El viroide de la mancha del sol (ASBVd) es persistente en cultivos nucelares de aguacate (Persea americana Mill.)
Abstract
Con el objetivo de determinar la posibilidad de obtener tejidos sanos a partir de plantas infectadas con ASBVd como una estrategia para recuperar clones de alto valor agronómico, cultivos embriogénicos de aguacate fueron inducidos a partir del nucelo de tres cultivares de aguacate infectados con el viroide de la mancha del sol (ASBVd) en un medio de cultivo con las sales mayores B5, suplementado con las sales menores de Murashige y Skoog (MS) y 0.41 uM de picloram, y (en mg/L-1) tiamina HCl (0.4), mio-inositol (100), sucrosa (30,000) y TC agar (8,000). Los cultivos embriogénicos inducidos fueron mantenidos en medio semisólido MS suplementado con 0.41 uM de picloram y (en mg/L-1) tiamina HCl (0.4), mio-inositol (100), sucrosa (45,000) y TC agar (8,000) y en medio líquido MS modificado con 15 mM NH4NO3 y 30 mM KNO3, sales menores de MS, picloram 0.41 uM y (en mg/L-1) tiamina HCl (0.4), mio-inositol (100) y sucrosa (45,000). La indexación usando RT-PCR un año después de inducidos los tejidos detectó bandas amplificadas en los electroferogramas y la clonación comprobó la presencia de 4 clones con mas de un 97% de similitud con la variante J02020 de ASBVd; con la secuencia se corroboró la existencia de las variantes CF3, CF8, CF13. Estos resultados demuestran que aunque ASBVd no es eliminado mediante el uso de embriogénesis somática, la aplicación de esta tecnología permite inducir, proliferar y mantener por largo tiempo tejidos infectados para el estudio de este patógeno.