Partial purification and characterization of xylanase produced by Penicillium expansum

Abstract

An extracellular xylanase was found to be the major protein in the filtrate culture of Penicillium expansum when grown on 0.3 % wheat bran, which showed no xylanase multiplicity. The enzime was partial purified by.ammonium sulfate fractioning, molecular exclusion chromatography, ultrafiltration and anion exchange chromatography. The protein eluation profile showed only one form of xylanase that was partially characterized. The activity of purified xylanase was optimal at pH 5.5 and 40 ºC. The enzyme was stable at pH between 5.5 and 6.5 and temperatures between 20-40 ºC. The enzyme showed a Km of 3.03 mM and Vmax of 0.027 mumol min-1 mug -1 of protein. The enzymatic activity was increased 31 % by Mg2+ and 28 % by Al3+.Uma xilanase extracelular foi encontrada como a principal proteína na cultura filtrada de Penicillium expansum quando cultivado em farelo de trigo 0,3 %, a qual não mostrou multiplicidade. A enzima foi parcialmente purificada por fracionamento com sulfato de amônia, cromatografia de exclusão molecular, ultrafiltração e cromatografia de troca aniônica. O perfil de eluição das proteínas mostrou uma única forma de xilanase, sendo esta parcialmente caracterizada. A atividade da xilanase purificada foi ótima em pH 5.5 e à temperatura de 40 ºC. A enzima foi estável em pH entre 5,5 e 6,5 e à temperatura entre 20-40ºC. A enzima apresentou Km de 3,03 mM e Vmax de 0,027 mimol min-1 mig-1 de proteína. A atividade enzimática foi aumentada 31 % por Mg+2 e 28 % por Al+3.

Keywords

• Partial purification
• xylan
• Penicillium expansum