شناسایی ژن‌های مولد بیوفیلم در سویه‌های کاندیدا آﻟﺒیکنس و ارزیابی نانوذره آهن بر بیان ژن als به روش Real Time-PCR

Abstract

هدف: تقریباً سه ‌چهارم زنان در معرض واژینیت کاندیدیایی هستند. از جمله عوامل بیماری‌زا می ‌توان به قدرت اتصال کاندیدا به بافت میزبان از طریق عواملی مانند مولکول ‌های چسبنده و پروتئین‌ هایی که این اتصال را تسریع می‌کنند اشاره نمود. هدف از انجام مطالعه حاضر؛ بررسی فراوانی ژن‌ های مولد بیوفیلم در سویه‌ های کاندیدا آﻟﺒﯿﮑﻨﺲ جداشده از واژینوز (Vaginosis) و بررسی مقایسه‌ ای بیان ژن als در سویه‌ های تحت تیمار (Treatment) با نانوذره آهن در شرایط آزمایشگاهی به روش Real Time-PCR می ‌باشد. روش­ بررسی: در این مطالعه توصیفی- مقطعی، تعداد 100 نمونه کاندیدا که از نمونه ‌های واژینوز زنان به ‌دست ‌آمده بود مورد بررسی قرار گرفت. پس از شناسایی سویه ‌های کاندیدا آلبیکنس با استفاده از تست‌ های بیوشیمیایی و میکروبیولوژیکی استاندارد، استخراج DNA ژنوم با استفاده از کیت شرکت سیناژن انجام گردید. به‌ منظور ردیابی ژن ‌های Als، Hwp1 و Hyr آزمون Multiplex-PCR انجام گردید. همچنین به‌ منظور بررسی اثر نانوذره آهن ‌بر بیان ژن ALS، RNA ­ سویه های حاوی این ژن با استفاده از کیت Cinnapure استخراج گردید و پس از تبدیل به CDNA، آزمون Real-Time PCR انجام شد. یافته­ ها: نتایج آنالیز مولکولی نشان داد که از 60 ایزوله کاندیدا آلبیکنس 34 ایزوله (65/66%) واجد ژن hwp ، 46 ایزوله (76/66 %) واجد ژن Als و 33 ایزوله (55%) واجد ژن Hyr بودند. نتایج مربوط به منحنی ذوب ژن Als در سویه‌ های بالینی کاندیدا آلبیکنس و تیمار شده با نانو ذره آهن نشان داد که Peak اصلی برای این ژن در دمای 85/34 درجه سلسیوس رخ می ‌دهد. نتیجه ‌گیری: بیان ژن Als در ایزوله‌ های تحت مطالعه تیمار شده نسبت به ایزوله‌ های تیمار نشده پایین‌تر بدست آمد که نشان دهنده نقش مثبت تیمار نانوذره آهن در کاهش بیان ژنAls در ایزوله ‌ها می باشد.

Keywords

• بیوفیلم
• کاندیدا آﻟبیکنس
• واژینوز
• نانوذره آهن
• real time-pcr