کلون و بیان آنتی بادی مونوکلونال نوترکیب تک زنجیره ای scFV علیه آنتی ژن Carcinoembryonic

Abstract

فناوری آنتی بادی‌های نوترکیب، تولید و کاربرد این نوع آنتی بادی‌ها را متحول نموده و برخی محدودیت‌های فناوری هیبریدوما را مرتفع نمود. آنتی بادی‌های مونوکلونال توانایی بالایی به عنوان عوامل تشخیصی، درمانی و به ویژه هدف قراردادن سلول‌های سرطانی دارند، اما کاربرد آن‌ها به واسطه اندازه بزرگشان با محدودیت‌هایی مواجه است. ساختار نواحی آنتی بادی‌ امکان تقسیم بندی آن‌ها را به زیر واحدهای کارا فراهم می‌سازد که این بخش‌ها می‌توانند با ترکیب شدن و اتصالات مختلف، مولکول‌های جدید کارآمدی را ایجاد نمایند. مولکول‌های scFvنسبت به آنتی بادی اولیه، به دلیل کاهش اندازه مزایای بسیاری دارند که مهمترین آن‌ها، کاهش پاسخ‌های ایمنی نسبت به آنتی بادی کامل موشی به واسطه فقدان بخش‌های ثابت می‌باشد. در این تحقیق ژن نواحی متغیر آنتی بادی مونوکلونال ضد مارکر توموری کارسینوامریونیک به صورت scFV ساخته شده و در ناقل فاژمیدی کلون شده و سپس بیان گردید. همچنین اختصاصیت آن توسط آزمون وسترن بلاتینگ بررسی شد. طبق نتایج حاصله ژن scfv با موفقیت ساخته شد. سپس کلونینگ و بیان آن انجام پذیرفت. در نهایت اختصاصی بودن آن نسبت به مارکر توموری کارسینوامریونیک، با وسترن بلاتینگ تائید گردید. آنتی بادی نوترکیب scFV بیان شده در این پژوهش، علی رغم کاهش اندازه، به طور اختصاصی قادر به شناسی آنتی‌ژن بود و از این‌رو می‌توان از آن در تشخیص و پایش برخی سرطان‌ها استفاده نمود. در مجموع ، از این روش می توان برای سنتز آنتی بادی های نوترکیب نوع scFV علیه سایر آنتی ژن‌ها استفاده کرد و از آن‌ها در تست‌های مختلف تشخیصی و درمانی بیماری‌ها استفاده نمود.

Keywords

• هیبریدوما
• مارکر توموری
• کلونینگ