补体系统C1q/C3介导的胶质细胞激活在小鼠抑郁样行为中的作用

Abstract

目的探讨小鼠的杏仁核中C1q/C3补体系统在诱导抑郁样行为过程中的作用途径。方法本实验分3部分：① 采用慢性束缚压力方法建立小鼠抑郁模型，将12只8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照（WT）组和抑郁模型（CRS）组，各6只，抑郁模型组造模2周。行为学测试系统悬尾实验（TST）、强迫游泳实验（FST）测试小鼠抑郁状态，采用免疫荧光染色法检测小鼠杏仁核中突触素（Syn）和突触后致密物（PSD95）变化情况，小胶质细胞（Iba-1）和星形胶质细胞（GFAP）细胞荧光强度，C1q、C3含量。② 6只8周CX3CR1-GFP雄性鼠，随机分为GFP组以及GFP模型（GFP+CRS）组，各3只，采用免疫荧光染色法观察小胶质细胞及星形胶质细胞相互作用情况。③ 12只8周龄雄性C57BL/6和12只C1q-/-小鼠随机分为对照（WT）组，抑郁模型（CRS）组，C1q敲除（C1q-/-）组，C1q敲除模型（C1q-/-+CRS）组，各6只，模型组组造模2周，行为学TST、FST检测4组小鼠抑郁状态，采用免疫荧光染色法检测四组小鼠杏仁核部位突触Syn和PSD95变化。结果行为学分析结果显示：与WT组比较CRS组在TST和FST中不动时间明显升高（P<0.000 1）；免疫荧光法测定，与WT组比较CRS组杏仁核内突触Syn、PSD95含量明显降低（P<0.000 1； P=0.003 8）；与WT组比较CRS组杏仁核内Iba-1和GFAP明显激活（P=0.000 4， P=0.003）且与WT组比较CRS组杏仁核内小胶质细胞与星形胶质细胞相互作用明显；与WT组比较CRS组杏仁核内C1q与C3产生明显增多（P=0.000 2， P=0.011 9）；行为学分析，WT、CRS、C1q-/-、C1q-/-+CRS 4组综合比较，在TST中，与CRS组比较，WT组不动时间明显升高，C1q-/-+CRS组不动时间也明显增高（均P<0.001）；在FST中，与CRS组比较，WT组不动时间明显升高，C1q-/-+CRS组不动时间也明显增高（均P<0.001）； 与CRS组比较WT组与C1q-/-+CRS组杏仁核内突触Syn明显增多（P<0.001；P<0.05），PSD95明显增多（P<0.05）。结论抑郁模型小鼠杏仁核内发生神经炎症，胶质细胞激活，表达补体C1q、C3，进一步激活小胶质细胞和星形胶质细胞修剪突触，导致突触含量降低，促使小鼠产生抑郁样行为；C1q基因缺陷阻断CRS诱导的小鼠突触丢失和抑郁样行为。

Keywords

• 慢性束缚刺激;杏仁核;补体