前列腺特异性膜抗原基因片段在酿酒酵母中的诱导表达及意义

Abstract

【目的】分析前列腺特异性膜抗原(PSMA)基因片段在酿酒酵母中的诱导表达情况，以便进一步探讨重组人PSMA的免疫活性并完成抗前列腺癌PSMA蛋白疫苗的制备。【方法】应用基因重组技术将人PSMAcDNA序列克隆入酿酒酵母穿梭诱导表达载体pYES2／NT，构建重组酵母真核表达质粒pYES2／NT-PSMA，转化酿酒酵母菌株INVSc1，尿嘧啶筛选出阳性克隆转化子，经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的Western blot检测。【结果】成功构建了PSMA的酵母真核表达重组子pYES2／NT-PSMA，并在酿酒酵母INVSc1中得到有效表达，Western blot显示两个特异性的人重组PSMA全蛋白片段，相对分子质量分别为M_r=100×10~3及M_r=85×10~3。【结论】人PSMA基因片段能够在酿酒酵母中表达并进行翻译后糖基化修饰，为下一步进行抗前列腺癌FSMA疫苗的研制奠定了良好基础。