O NOCAUTE DE IRS2 IMPACTA A CONSTITUIÇÃO EM LONGO PRAZO DAS SUBPOPULAÇÕES DE CÉLULAS-TRONCO HEMATOPOETICAS

Abstract

Objetivos: O substrato do receptor de insulina 2 (IRS2) interage com receptores envolvidos no processo hematopoético e sua expressão é reduzida em pacientes com síndrome mielodisplásica. Em trabalho anterior, nosso grupo descreveu os resultados da avaliação da reconstituição da hematopoese a curto prazo após transplante de medula óssea (TMO) de camundongos nocaute para Irs2 (Irs2 KO) em receptores C57BL/6. A análise, 4 e 8 semanas após o transplante, evidenciou uma redução nos níveis de hemácias, hematócrito e hemoglobina no grupo transplantado com células de medula óssea de animais Irs2 KO em comparação com animais receptores de camundongos selvagem (WT). Após 8 semanas do transplante, a contagem de plaquetas também reduziu em animais receptores de Irs2 KO. O presente trabalho tem como objetivo principal, avaliar os efeitos em longo prazo do TMO de células Irs2 KO sobre a constituição das populações hematopoéticas. Material e métodos: A hematopoese de camundongos C57BL/6 previamente submetidos a TMO com células de animais B6.129-Irs2tm1Mfw (WT: n = 3 e Irs2 KO: n = 5) foi avaliada 12 meses pós-TMO. Os parâmetros hematológicos do sangue periférico (SP) foram avaliados por hemograma automatizado. O quimerismo e a constituição das populações hematopoéticas do SP, medula óssea (MO) e baço foi analisada por citometria de fluxo. Resultados: Os níveis de quimerismo se mantiveram elevados após 12 meses de transplante, variando entre 89,1 a 98,1% de células CD45.2 no sangue periférico. O quimerismo não diferiu entre os grupos, com mediana de 96,1 e 93,6 para os receptores de animais WT e Irs2 KO, respectivamente. Não houve diferença significativa entre o peso corporal e peso do baço entre os grupos (todos p > 0,05). A avaliação dos parâmetros hematológicos por hemograma automatizado revelou uma redução de glóbulos brancos (WT: 13,7 x 103/μL vs. Irs2 KO: 8,7 x 103 μL) e plaquetas (WT: 1226 x 103/μL vs. Irs2 KO: 266 x 103/μL) no grupo que recebeu células Irs2 KO; todos p 0,05). Receptores de Irs2 KO apresentaram um aumento na subpopulação EriB [Irs2 KO: 22,1% vs. WT:15,9%). As populações de linfócitos B, linfócitos T e células mieloides não diferiram entre os grupos (todos p > 0,05). Discussão e conclusão: A avaliação final dos animais receptores indicou que o grupo que recebeu células Irs2 KO apresentou redução de leucócitos e plaquetas. Aos 12 meses, os animais não apresentaram redução da série vermelha, diferindo dos resultados obtidos nas avaliações em curto prazo. As populações de progenitores mieloides e de CTHs, incluindo LT-HSC e ST-HSC estavam aumentadas em animais que receberam células de doadores nocaute para Irs2. Os achados sugerem uma alteração funcional das CTHs, levando a um aumento compensatório dessas populações. Financiamento: FAPESP, CAPES e CNPq.