Acta Biológica Colombiana (Jan 2006)
Expresión heteróloga de ARN mensajeros de Leishmania en ovocitos de anfibios
Abstract
La técnica de expresión heteróloga en ovocitos de Xenopus laevis ha sido ampliamente utilizada para la caracterización funcional de canales iónicos. En este estudio se reporta el uso del modelo nativo de ovocitos de Bufo marinus para la expresión heteróloga de ARN poliadenilado (ARNm poli(A)+) de Leishmania amazonensis y la posterior identificación de canales iónicos mediante registros electrofisiológicos utilizando la técnica de voltaje controlado (voltage-clamp). Se logró realizar la maduración, extracción y cultivo de ovocitos de B. marinus bajo condiciones similares a las estandarizadas para X. laevis. El potencial de reposo promedio así como las corrientes endógenas mostraron ser definidas por canales de cloruro dependientes de calcio y rectificadores de salida, de manera similar a lo reportado en X. laevis. La inyección de ARNm poli(A)+ de L. amazonensis generó la expresión de corrientes de cloruro de amplitud, cinética y características farmacológicas diferentes a las corrientes endógenas, reportadas en estudios previos con X. laevis como posible resultado de la expresión heteróloga de canales iónicos de L. amazonensis.
