طراحی و توسعه‌ی Nested PCR سه‌گانه جهت تشخیص هم‌زمان Plasmodium، Babesia و Toxoplasma در فرایند انتقال خون

Abstract

مقدمه: تشخیص و رفع عفونت‌های قابل انتقال از طریق انتقال خون از اهمیت به‌سزایی برخوردار می‌باشند. هدف از انجام این مطالعه، تشخیص Plasmodium، Toxoplasma و Babesia به طور هم‌زمان در نمونه‌های خون بود.روش‌ها: این مطالعه از نوع تجربی و توسعه‌ی روش Triplex nested-Polymerase chain reaction (Triplex nested-PCR) جهت ارتقای سلامت فرایند انتقال خون است که طی سال 1398 در اصفهان انجام گردید. پس از طراحی مطالعه و انتخاب پرایمرها، ابتدا روش مولکولی Nested PCR برای هر انگل در سطح جنس با استفاده از نمونه‌های خون با تعداد معین انگل اعمال شد. سپس، با تجمیع شرایط لازم، Nested PCR چندگانه کارسازی شد.یافته‌ها: واکنش سه‌گانه‌ی Triplex nested PCR در مقایسه با روش میکروسکوپی و Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)، دارای اعتبار تشخیصی بالاتری بود؛ به گونه‌ای که مقدار حساسیت، ویژگی، ارزش اخباری مثبت و منفی برای تشخیص Plasmodium به ترتیب 100، 100، 100 و 100 درصد، برای Toxoplasma به ترتیب 100، 91، 92 و 100 درصد و برای Babesia به ترتیب 94، 100، 100 و 89 درصد ارتقا یافت. مقادیر اعتبار این آزمون برای Plasmodium، بالاترین میزان در مقایسه با دو انگل دیگر بود.نتیجه‌گیری: بر اساس نتایج این تحقیق، روش سه‌گانه‌ی (TN-PCR) Nested می‌تواند به طور هم‌زمان، یک، دو یا هر سه پاتوژن خطرناک را در نمونه‌های بیولوژیکی و همچنین، نمونه‌ی خون در فرایند انتقال خون را با دقت بالایی شناسایی کند.

Keywords

• plasmodium
• babesia
• toxoplasma
• nested polymerase chain reaction
• انتقال خون