تشخیص عفونت تیلریا بروش PCR‌ وشناسائی ملکولی ژن Tams1 در تیلریا آنولاتا سویه واکسن

Abstract

بمنظور راه اندازی روشی در تشخیص و شناسائی تک یاخته تیلریا آنولاتا، پرایمرهای اختصاصی مربوط به توالی آنتی ژن سطحی مروزوایت تیلریا آنولاتا (Tams1)‌ برای تشخیص عفونت این تک یاخته بروش Nested-PCR‌ بکار برده شد. در این بررسی تکنیکی موثر برای شناسائی تیلریا آنولاتا از نمونه های بالینی معرفی می شود که قادر به شناسائی تک یاخته با حساسیت و ویژگی بالائی می باشد. میزان حساسیت PCR‌ در این روش تا 1.34 pg‌ در DNA‌ آلوده به تک یاخته بوده و ویژگی آن نیز با تعیین توالی قطعه بدست آمده و همچنین استفاده از DNA‌ های هتروژن نشان داده شد. حساسیت بالای روش Nested-PCR می تواند بمنظور ردیابی و تشخیص بهتر عفونت و نیز طراحی کلان در اقدامات درمانی مناسب بکار برده شود. در ضمن مقایسه توالی ها و آنالیز فیلوژنتیک توالی Tams1 سویه ها و جدایه های در دسترس نشان داد که ناحیه‌ای خاص در سویه واکسن ایران وجود دارد که با آنزیم محدودگر AvaII قابل شناسائی می باشد که آنرا از سایر سویه ها و جدایه های وحشی متمایز می کند. نتایج این مطالعه در بررسی های مربوط به کنترل و پیشگیری از بیماری و همچنین مطالعات اپیدمیولوژیک می تواند مورد استفاده قرارگیرد.

Keywords

• تیلریا آنولاتا
• واکنش زنجیره ای پلیمراز
• فیلوژنتیک