RIP140通过抑制SIRT5表达介导心肌细胞能量代谢紊乱

Abstract

【目的】探讨去琥珀酰化酶Sirtuin5（SIRT5）对受体相互作用蛋白140（RIP140）诱导的心肌线粒体能量代谢紊乱的影响。【方法】利用腺病毒感染心肌细胞诱导 RIP140 过表达，利用质粒转染诱导 SIRT5 基因过表达，siRNA 干扰敲低 RIP140、SIRT5表达；qRT-PCR和Western blot检测SIRT5、RIP140的表达变化；qRT-PCR检测线粒体编码基因的表达情况， TMRE染色法评估线粒体膜电位，试剂盒检测细胞耗氧和ATP生成情况。所有数据均来自至少3次的独立实验。【结果】过表达RIP140明显抑制SIRT5的表达（P<0.05）；敲低内源性RIP140能增加SIRT5的表达（P<0.05）。过表达RIP140亦能诱导线粒体蛋白高度琥珀酰化，抑制SIRT5的去琥珀酰化酶活性。除此，RIP140能诱导线粒体功能紊乱和能量代谢损伤作用，表现为线粒体编码基因的表达抑制（P<0.05），线粒体膜电位降低（P<0.05），细胞耗氧和ATP合成减少（P<0.05），而过表达 SIRT5能抑制RIP140介导的上述能量代谢损伤（P<0.05）。此外，SIRT5受RIP140的负性调控作用依赖于过氧化物增殖体激活受体α（PPARα）。【结论】RIP140通过抑制SIRT5诱导心肌细胞线粒体功能紊乱和能量代谢损伤。

Keywords

• SIRT5;RIP140;线粒体代谢;心肌代谢紊乱