Ácido L-glutâmico na prevenção da calcificação de pericárdio bovino fixado em glutaraldeído: estudo em ratos L-glutamic acid in the prevention of the calcification of bovine pericardial fixed in glutaraldehyde: study in rats

Abstract

OBJETIVO: Avaliar a eficácia do ácido L-glutâmico na prevenção da calcificação do pericárdio bovino implantado no subcutâneo de ratos. MÉTODO: Utilizaram-se 54 ratos Wistar, distribuídos em seis grupos, de acordo com o segmento de pericárdio bovino implantado. Inicialmente, todos os pericárdios foram fixados com glutaraldeído 0,5% por 72h. No grupo I, após a fixação, o pericárdio foi preservado em glutaraldeído 0,2% até o implante. O grupo II foi estocado em solução de Paraben. No grupo III e IV, após a fixação inicial, os pericárdios foram tratados com ácido L-glutâmico 8% com pH 7,4 e 3,5, respectivamente, sendo em seguida estocados em Paraben. Os grupos V e VI foram semelhantes aos grupos III e IV, exceto pela concentração do ácido L-glutâmico que foi de 0,8%. Os explantes foram feitos com 15, 30 e 60 dias, e as amostras submetidas à análise histológica com hematoxilina-eosina e Von Kossa, além da mensuração de cálcio por espectofotometria de absorção atômica. RESULTADOS: A mensuração por espectofotometria de absorção atômica demonstrou aumento progressivo da calcificação nos grupos I, II e III, aos 15, 30 e 60 dias. Nos grupos IV, V e VI, os níveis de cálcio permaneceram sem alteração nos períodos estudados. A análise microscópica demonstrou calcificação progressiva nos grupos I, II e III. Nos grupos IV, V e VI, a calcificação, quando observada, foi focal e de grau leve. CONCLUSÃO: O uso do ácido L-glutâmico em segmentos de pericárdio bovino, fixados pelo glutaraldeído, foi efetivo na prevenção da calcificação, quando implantados no subcutâneo de ratos por até 60 dias.OBJECTIVE: To evaluate the efficiency of L-glutamic acid to prevent calcification of glutaraldehyde bovine pericardium implanted in rats' subcutaneous tissues. METHODS: Fifty four Wistar rats were divided in six groups according to the type of the bovine pericardium implanted. At first, all pericardia were initially cross-linked with 0.5% glutaraldehyd (GDA) fixative for 72 h. In Group I, after the initial fixation, the pericardia were preserved in 0.2% GDA fixative until the implantation, whereas in Group II they were stocked in Paraben solution. In Groups III and IV, after the initial fixation in 0.5% GDA fixative, the pericardia were treated with 8% L-glutamic acid at pH 7.4 and 3.5, respectivelly, being subsequently stocked in Paraben solution. Groups V and VI were similar to III and IV, except for the concentration of L-Glutamic acid which was 0.8%. Explantation was done at 15, 30, and 60 days, and the specimens submitted to histological analysis with Hematoxylin and eosin (HE) and Von Kossa stains, besides calcium quantification with atomic spectrofotometry. RESULTS: Microscopic analysis demonstrated severe and progressive calcification in groups I, II, and III, whereas in groups IV, V, and VI calcification, when present, was mild and focal. Spectrofotomety confirmed these findings, revealing calcium contents of 1.93µg/mg of tissue at 60 days in the control group. Groups IV and VI showed the least calcium contents (0.063 e 0.066, respectively). CONCLUSIONS: The use of L-glutamic acid in segments of bovine pericardium with glutaraldehyde fixative was effective in preventing the calcification when implanted in rats' subcutaneous up to 60 days.

Keywords

• Ácido glutâmico
• Glutaral
• Pericárdio
• Calcinosis
• Glutamic acid
• Glutaral
• Pericardium
• Calcinosis