مجلة ابحاث كلية التربية الاساسية (Dec 2014)
تنقية انزيم كلوتاثايون بيروكسيديز ودراسة علاقته مع بعض المتغيرات الكيموحيوية في مرضى النوع الثاني من داء السكر
Abstract
تضمن البحث تحديد مستوى فعالية انزيم كلوتاثيون بيروكسيديز وعلاقته ببعض المتغيرات الكيموحيوية في مصل دم المصابين بالنوع الثاني من داء السكر. فقد وجد ان فعالية انزيمي كلوتاثايون بيروكسيديز وكلوتاثايون-S-ترانسفيريز فضلا عن مستوى الكلوتاثايون انخفضت معنويا (p<0.05)، في حين ان فعالية انزيمي سوبر اوكسايد ديسميوتيز وبولي امين اوكسيديز، ومستويات الكلوكوز والهيموكلوبين المتسكر والمالوندايالديهايد وهرمون الانسولين ومقاومة هرمون الانسولين ارتفعت معنويا في المصابين مقارنة بالسليمين.كما وجد ان العلاقة طردية بين انزيم كلوتاثايون بيروكسيديز وكلا من انزيمي كلوتاثايون-S-ترانسفيريز(r=0.417) وسوبر اوكسايد دسميوتيز(r=0.644) والكلوتاثايون (r=0.521). بينما كانت عكسية بين انزيم كلوتاثايون بيروكسيديز والمالوندايالديهايد (r=0.542 - ) كذلك تناولت الدراسة التنقية الجزئية لأنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز من مصل دم المصابين بالنوع الثاني من داء السكر، باستخدام تقنيات الفرز الغشائي والتمرير عبر المبادل الأيوني DEAE-cellulose . وقد تم الحصول على قمة بروتينية واحدة تمتلك فعالية أنزيم كلوتاثايون بيروكسيديز بفعالية نوعية 0.128 وحدة انزيمية/ ملغم بروتين بعدد مرات تنقية 10.27 مرة مقارنة بالانزيم الخام.ودرست الخصائص الحركية لأنزيم كلوتاثيون بيروكسيديز المنقى جزئيا وتبين ان الفعالية القصوى للأنزيم كانت عند 12.8 مايكروغرام من الانزيم، ومحلول الصوديوم- بوتاسيوم فوسفات المنظم عند دالة حامضية 7.3 ودرجة حرارة 37°م وزمن حضن 8 دقائق. وباستخدام ايون الصوديوم بتركيز 10 مليمولار، كما وجد ان قيمتي السرعة القصوى وثابت ميكايليس- مينتون كانتا 0.31 وحدة انزيمية / مل و1.538 ملي مولار على التوالي.
