Archives of Razi Institute (Jul 2017)
طراحی و ارزیابی روش رونوشت برداری معکوس و واکنش تکثیری هم دما به واسطه لوپ برای شناسایی اسهال ویروسی گاو ویروس 1 و 2
Abstract
ویروس اسهال ویروسی گاو یک عامل بیماریزا برای گاوها میباشد و دارای اهمیت اقتصادی در همه دنیا است. این عامل باعث تحمیل هزینههای فراوان به صنعت دامپروری میشود. روش تک مرحلهایی رونوشت برداری معکوس و تکثیر هم دما به واسطه لوپ (RT-LAMP) برای شناسایی سریع و موثر ویروس اسهال ویروسی گاو طراحی گردید. چهار پرایمر بر اساس ناحیه حفاظت شده غیر ترجمهایی انتهای΄5 (5΄UTR) ژنوم ویروس اسهال ویروسی گاو برای تشخیص شش محل مختلف روی RNA هدف طراحی گردید. هشتاد نمونه خون از دامهای مشکوک به اسهال ویروسی گاو جمع آوری و به طور همزمان با دو روش RT-PCR وRT-LAMP تست شدند. 24 نمونه از این تعداد با روشRT-LAMP مثبت شدند. درحالیکه با روش RT-PCR بیست نمونه مثبت شدند. حد شناسایی برای روش RT-LAMP تقریبا PFU/mL70 تخمین زده شد. مقایسه روش RT-PCR با RT-LAMP نشان داد که روش جدید طراحی شده به عنوان یک روش حساس و اختصاصی توانایی تشخیص این ویروس در نمونه های کلینیکی را دارد.
Keywords