Archives of Razi Institute (Jun 2013)
جداسازی و شناسایی مایکوپلاسما آگالاکتیه از گوسفندان استان قم با استفاده از روش‌های کشت و واکنش زنجیره‌ای پلیمراز
Abstract
آگالاکسی یکی از سندروم های عفونی در گوسفند می‌باشد که دام‌های مبتلا معمولا" دچار تورم پستان، کاهش تولید شیر، آرتریت، سقط جنین و التهاب ملتحمه چشم می‌شوند. مایکوپلاسما آگالاکتیه عامل اصلی این بیماری در گوسفندان محسوب می‌شود. هدف از انجام این مطالعه جداسازی و شناسایی مایکوپلاسما آگالاکتیه ازگوسفندان استان قم با استفاده از روش‌های کشت و واکنش زنجیره‌ای پلیمراز بود. در این مطالعه در مجموع 102 نمونه ( شیر، سواپ چشم، سواپ گوش و مایع مفصلی) ازگوسفندان مشکوک به آگالاکسی اخذ شد و در آزمایشگاه رفرانس مایکوپلاسما موسسه رازی به صورت همزمان در محیط‌های اختصاصی PPLO مورد کشت و آزمون واکنش زنجیره‌ای پلیمراز قرار گرفتند. استخراج DNA به روش فنل-کلروفرم انجام گرفت و آزمون واکنش زنجیره‌ای پلیمراز بر روی نمونه‌های استخراجی با استفاده از پرایمرهای اختصاصی با محصولاتی به طول 163جفت باز در ناحیه ژن 16S rRNA برای جنس مایکوپلاسما و 375 جفت باز در ناحیه ژن لیپوپروتئین سطحی برای گونه مایکوپلاسما آگالاکتیه انجام شد. از 102 نمونه، 19 نمونه دارای پرگنه اختصاصی در محیط کشت PPLO آگار بوده و به عنوان مایکوپلاسما مورد شناسایی قرار گرفتند و 59 نمونه نیز در آزمون واکنش زنجیره‌ای پلیمراز جنس مایکوپلاسما مثبت بودند. 19 نمونه نیز در آزمون واکنش زنجیره‌ای پلیمراز گونه مایکوپلاسما آگالاکتیه مثبت تشخیص داده شدند که همگی آنها در آزمون واکنش زنجیره‌ای پلیمراز جنس مایکوپلاسما مثبت بودند. از 102 نمونه 19 نمونه کشت مثبت و واکنش زنجیره‌ای پلیمراز مثبت، 42 نمونه کشت منفی و واکنش زنجیره‌ای پلیمراز منفی بودند در حالیکه 40 نمونه کشت منفی و واکنش زنجیره‌ای پلیمراز مثبت و تنها 1 نمونه کشت مثبت و واکنش زنجیره‌ای پلیمراز منفی بود. دراین مطالعه بیشترین موارد جداسازی مایکوپلاسما آگالاکتیه از نمونه‌های شیر و کمترین موارد از مایع مفصلی بودند. همچنین این مطالعه جداسازی مایکوپلاسما آگالاکتیه را برای اولین بار از گوسفندان استان قم گزارش می‌کند و نشان می‌دهد که مایکوپلاسما آگالاکتیه یکی از عوامل اصلی آگالاکسی در گوسفندان استان قم می‌باشد.
Keywords
