胰岛素样生长因子Ⅰ与透明质酸对人胚关节软骨细胞表型的影响

Abstract

【目的】研究胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)和透明质酸(HA)联合培养对人关节软骨细胞生物学行为的影响, 判 断其稳定软骨细胞表型的效果。【方法】分离培养人关节软骨细胞, 从第4 代开始, 用hIGF-Ⅰ 和HA 联合培养, 通过电镜观 察、甲苯胺蓝染色、Ⅱ 型胶原和aggrecan 免疫组化及RT-PCR 判断联合培养第8 代软骨细胞表型的变化。自然传代的第6 代 细胞为对照组。【结果】IGF-Ⅰ 和HA 联合培养的第8 代细胞胞浆内含有丰富的粗面内质网和分泌小泡;RT-PCR 显示Ⅱ 型胶 原mRNA 表达阳性而Ⅰ 型胶原mRNA 表达阴性;甲苯胺蓝染色显示细胞浆内有大量的紫色异染颗粒;Ⅱ 型胶原和agg recan 免疫组化见80 %～ 92 %的细胞染色呈阳性或强阳性, 平均灰度分别为85.92 和116.23, 均显著低于对照组, 说明处理组染色 较对照组增强。【结论】IGF-Ⅰ 和HA 联合培养的第8 代细胞仍能保持透明软骨细胞的表型, 为体外获得高数量级别的有正 常功能的人关节软骨细胞提供一种新方法。