A simplified CsCL protocol for lambda DNA purification: no enzymatic treatment/one phenol extraction

Abstract

A modification of the CsCl gradient centrifugation method for DNA phage purification is presented. It avoids the enzymatic steps as well the need for a preliminary phage titration, a tedious process proposed in the majority of the protocols in use. The quality of the DNA obtained makes it amenable for additional manipulations like digestions, ligations, labelling, subcloning, etc.É proposta uma modificação para o tradicional protocolo de purificação de DNA de fago que utiliza gradiente de cloreto de césio. Este método evita etapas enzimáticas assim como a necessidade de uma titulação prévia, um processo que consome tempo e é proposto na maioria dos métodos em uso. A qualidade do DNA obtido permite manipulações adicionais, tais como digestões, ligações, marcações, subclonagens, etc.