Acta Biológica Colombiana (Jan 2007)
Evaluación inmunotoxicológica de compuestos con potencial farmacológico empleando ratones como modelo experimental
Abstract
La investigación en inmunotoxicología (IMT), una especialidad de la toxicología que estudia los efectos tóxicos o adversos de moléculas o compuestos sobre el sistema inmune inicia con el reporte de una susceptibilidad marcada de algunos animales al ataque de patógenos resultado de la exposición a diferentes moléculas tales como acetato de plomo, acetato de cadmio, 2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina. A partir de ese momento el interés en la IMT ha venido en aumento, debido entre otros al papel fundamental que juega la investigación en esta rama en el desarrollo principalmente de medicamentos. En ocasiones, algunos efectos secundarios causados por fármacos no pueden ser evidenciados por medio de las técnicas convencionales de toxicidad, y es posible que sean atribuidos a eventos post-exposición que se manifiestan en una modulación no esperada de la respuesta inmune, la cual y hasta hace un tiempo no era considerada dentro de los parámetros a estudiar. Si bien, la gran mayoría de los fármacos han contribuido en la solución de distintas patologías, en ocasiones también inducen alteraciones en el organismo que solo con la implementación de nuevas técnicas han podido ser evidenciados. A este nivel, el aporte de la IMT se ha demostrado al punto de ser indispensable el análisis de la incidencia o no de un compuesto sobre el sistema inmune para catalogarlo como un compuesto ciertamente seguro. Toda la gama de efectos adversos se puede clasificar en cuatro categorías, a saber: inmunosupresión, inmunoestimulación, hipersensibilidad y autoinmunidad. Para establecer el efecto inmunomodulador de fármacos o compuestos, es necesario conocer y estandarizar los parámetros inmunológicos del modelo experimental empleado (el ratón es uno de los más utilizados) que pudieran permitir esclarecer el efecto adverso sobre el sistema inmune. El establecer valores de referencia para poblaciones celulares, así como parámetros funcionales enmarcados en la normalidad para cepas nativas, resulta de fundamental interés, ya que es este modelo el utilizado de forma rutinaria en la evaluación de las nuevas moléculas candidatas a compuesto activo. En este trabajo como molécula modelo se empleó la ciclosporina A (CSA), un reconocido fármaco inmusupresor empleado en diversos tipos de transplantes y como molécula blanco se evaluó la Pentamidina, cuyo potencial tóxico ha sido demostrado in vivo cuando enfermedades parasitarias en humanos han sido tratadas con este medicamento. Los fármacos fueron evaluados empleando dos cepas murinas como modelo experimental, siendo el bazo el órgano linfoide seleccionado para realizar el estudio, debido a la alta densidad de células linfoides y a su relativa fácil manipulación. Las subpoblaciones celulares de interés que se evaluaron en este órgano, fueron células T colaboradoras (CD4+), células T citotóxicas (CD8+), células B (CD19+) y monocitos y macrófagos (CD14+), las cuales fueron detectadas por medio de anticuerpos monoclonales específicos para los co-receptores de superficie a su vez acoplados a fluorocromos detectables por citometría de flujo. Los resultados permitieron concluir que hay diferencias significativas en la respuesta a los fármacos dependiente de la cepa siendo los esplenocitos CD8+ de los ratones BALB/c más susceptibles al efecto de la Pentamidina, mientras que las células CD19+ de los ratones ICR resultaron más sensibles al tratamiento con CSA. Proponemos que la metodología empleada en nuestro estudio sea implementada para monitorear el potencial inmunotóxico de múltiples fármacos, constituyéndose en una herramienta valiosa al momento de determinar la seguridad de compuestos con potencial farmacológico. El Departamento de Farmacia de la Universidad Nacional de Colombia continuará liderando la investigación conducente al descubrimiento de nuevos fármacos más seguros, a través de la línea de investigación en el área de inmunotoxicología, contribuyendo de manera directa no solo a la formación de recurso humano sino aportando al desarrollo de la industria farmacéutica nacional.
