Romanian Journal of Laboratory Medicine (Mar 2014)
Determination of genistein in rat liver and kidney by a HPLC/UV method. Possible extrapolation from animals to humans
Abstract
A fost validată o metodă simplă şi selectivă de determinare a genisteinei (GNST) din ficat şi rinichi de şobolan în vederea studierii efectului fitoestrogenic al GNST la șobolani Wistar de sex feminin ovariectomizaţi. GNST a fost separată pe o coloană Kromasil 100-RP8, de 150 mm x 4,6 mm, 5 μm prevăzută cu precoloană Kromasil RP 8. Faza mobilă a fost 55:45 (v/v) acid fosforic 15 mmol în apă : metanol la un debit de 1,3 ml/min. Ca standard intern a fost folosită luteolina 20 μg/ml în metanol. Timpul de retenţie al GNST a fost tR = 13,22 min şi tR = 11,60 min pentru standardul intern. Curbele de calibrare pe domeniul 40-400 μg GNST/100g ficat şi 20-200 μg GNST/100g rinichi au prezentat coeficienţi de determinare ˃0,99. Metoda a prezentat o bună precizie şi acurateţe la limita de cuantificare. 10 şobolani albi Wistar de sex feminin, cu vârsta de 8 săptămâni au fost trataţi s.c. cu 10 mg/kg c/zi soluţie GNST timp de 8 săptămâni, în timp ce un lot de 10 animale au folosit ca martor. Valorile obţinute pentru GNST în ficat au fost 192.12 ± 53.46 μg/100g, iar în rinichi 74.51 ± 12.77 μg/100g.
Keywords
