SELETIVIDADE DO MULTI-INIBIDOR DE TIROSINAQUINASE TKI-258 PARA LINHAGENS DE NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS

Abstract

Objetivos: Atualmente, o emprego de inibidores de tirosina quinase (TKIs) constitui uma importante opção terapêutica para neoplasias hematológicas. O TKI-258 é um inibidor multi-alvos em fase de estudos que apresenta potencial como quimioterápico para diversos tipos de neoplasias. O índice de seletividade (IS) é um parâmetro bem estabelecido para avaliar a janela entre a citotoxicidade e o efeito antineoplásico de diferentes drogas. O objetivo deste estudo é determinar os índices de citotoxicidade do TKI-258 em diferentes linhagens celulares oncohematológicas e avaliar a seletividade da droga às células tumorais em relação a linfócitos de indivíduos saudáveis. Material e métodos: Foram utilizadas células das linhagens K-562 de leucemia mieloide crônica (LMC), Jurkat de leucemia linfoide aguda (LLA) e Raji de linfoma de Burkitt, bem como células mononucleares de sangue periférico (PBMCs) separadas a centrifugação em gradiente de concentração por Ficoll-Paque™. As células foram mantidas em incubadora úmida a 37°C em meio RPMI-1640 contendo 10% de soro fetal bovino, penicilina e estreptomicina 100 UI/mL e, então, 1x105 células controle e tratadas com TKI-258, em concentrações de 0,25 μM, 0,5 μM, 1 μM, 2 μM e 4 μM, foram semeadas por poço e mantidas por 36 horas. Os índices de citoxicidade (IC50) foram determinados por citometria de fluxo por meio da marcação com iodeto de propídio, marcador de morte celular, e calculados a partir de testes de regressão não linear. O programa GraphPad Prism 9.0.0 foi utilizado para as análises estatísticas. Os IS's foram obtidos a partir da razão entre a citotoxicidade para PBMCs (CC50) e para células neoplásicas (IC50). Resultados: O CC50 do TKI-258 em PBMCs foi de 1,702 (r = 0,9696). Em células K562, o IC50 foi de 2,229 (r = 0,8286); em células Jurkat, de 1,850 (r = 0,8867); e em células Raji, de 0,7623 (r = 0,8246). O índice de seletividade da droga para as diferentes linhagens foi de 0,76, 0,92 e 2,23, respectivamente. Discussão: Visto que as drogas disponíveis para tratamento de neoplasias hematológicas são passíveis de falha, resistência medicamentosa e efeitos adversos importantes, o desenvolvimento de novas terapias é fundamental. Os TKIs alvo-específicos constituem terapia padrão ouro para a LMC, porém poucos estudos visam avaliar a viabilidade da inibição dos receptores de tirosinaquinase como estratégia terapêutica para outros cânceres hematológicos, como LLA e Linfoma de Burkitt. O TKI-258 é um inibidor multi-alvos que apresentou, neste estudo, baixa seletividade para as linhagens de LMC e LLA, porém foi significativamente seletivo para as células de Linfoma de Burkitt, apresentando efeito antioncogênico maior que o efeito citotóxico. Conclusão: O estudo demonstrou que o TKI-258 é eficaz para indução de morte celular de forma seletiva para células Raji de Linfoma de Burkitt, embora a droga não tenha tido bom desempenho para as outras neoplasias testadas. O bom índice de seletividade da droga na linhagem de Burkitt nos testes in vitro pode indicar uma menor incidência de efeitos colaterais relacionados à imunossupressão com o uso in vivo. Desse modo, novos estudos devem ser considerados para avaliar o potencial terapêutico do TKI-258 para o Linfoma de Burkitt.